| miR-139-5p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证 |
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| 引用本文： | 姜嫄,黄卓君,强兆艳,吴艳娜.miR-139-5p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证[J].中国药理学通报,2015(1):127-130. |
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| 作者姓名： | 姜嫄 黄卓君 强兆艳 吴艳娜 |
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| 作者单位： | 1. 天津医科大学 药理学教研室,天津,300070
2. 天津医科大学 基础医学院,天津,300070 |
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| 基金项目： | 国家自然基金项目，天津市自然科学基金资助项目，天津市高校国家级大学生创新创业训练计划项目:201310062007 |
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| 摘 要： | 目的构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,检测其在H9c2细胞的表达效果。方法根据大鼠miR-139-5p序列,设计合成其靶点序列,并合成寡核苷酸双链,克隆入慢病毒载体p GC-LV,与p Helper 1.0和p Helper 2.0共转染293T细胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染H9c2细胞。荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后H9c2细胞中miR-139-5p的相对表达量。结果成功构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,病毒感染H9c2细胞的效率超过95%,miR-139-5p表达明显减少。结论成功构建了miR-139-5p低表达慢病毒载体,包装的病毒可在H9c2细胞中实现抑制miR-139-5p表达的效果。
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| 关 键 词： | miR-139-5p 慢病毒载体 H9c2细胞 感染 qRT-PCR 低表达 |
Construction of a lentiviral low expression of miR-139-5 p vector and validation of its transduction efficiency in H9 c2 cells |
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| JIANG Yuan,HUANG Zhuo-jun,QIANG Zhao-yan,WU Yan-na.Construction of a lentiviral low expression of miR-139-5 p vector and validation of its transduction efficiency in H9 c2 cells[J].Chinese Pharmacological Bulletin,2015(1):127-130. |
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| Authors: | JIANG Yuan HUANG Zhuo-jun QIANG Zhao-yan WU Yan-na |
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| Institution: | JIANG Yuan;HUANG Zhuo-jun;QIANG Zhao-yan;WU Yan-na;Dept of Pharmacology,Tianjin Medical University;Basic Medical College,Tianjin Medical University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-139-5 p lentiviral vectors H9 c2 cells infection qRT-PCR low expression |
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