| 超声微泡介导绿色荧光蛋白基因在视网膜神经节细胞表达的实验研究 |
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| 引用本文： | 李伟,刘苏,王志刚.超声微泡介导绿色荧光蛋白基因在视网膜神经节细胞表达的实验研究[J].中华超声影像学杂志,2007,16(4):353-356. |
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| 作者姓名： | 李伟 刘苏 王志刚 |
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| 作者单位： | 1. 400010,重庆医科大学附属第二医院眼科
2. 400010,重庆医科大学附属第二医院超声科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目（30430230）及面上项目（30370402） |
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| 摘 要： | 目的探讨超声微泡介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因在视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)中的转染效率、优化转染的条件及毒性。方法体外培养RGCs,以GFP基因为报告基因,微泡造影剂(声诺维)为载体,用超声辐照介导质粒pEGFP-N1转染RGCs。实验组为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组,超声+微泡+质粒组根据转染条件不同分成亚组;对照组为空白对照。荧光显微镜和流式细胞仪测定GFP的表达,MTT法检测RGCs的活性。结果与超声+质粒组相比,超声+微泡+质粒组RGCs转染率增加约5倍。优化转染条件后,频率300kHz,声强1.25W/cm2,连续波,辐照时间60s,微泡浓度45μg/ml,质粒浓度50μg/ml时,24孔板培养的RGCs转染率为(26.87±3.12)%。毒性实验证明超声微泡在该条件下进行基因转染对RGCs无毒副作用。结论在一定条件下,超声破裂微泡能增强基因的转染与表达,有望成为一种安全、有效的基因载体。
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| 关 键 词： | 超声检查 造影剂 视网膜神经节细胞 基因转移技术 |
| 收稿时间： | 2006-06-02 |
Ultrasound-mediated microbubble destruction enhances green fluorescent protein gene expression in retinal ganglion cells in vitro |
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| LI Wei,LIU Su,WANG Zhi-gang.Ultrasound-mediated microbubble destruction enhances green fluorescent protein gene expression in retinal ganglion cells in vitro[J].Chinese Journal of Ultrasonography,2007,16(4):353-356. |
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| Authors: | LI Wei LIU Su WANG Zhi-gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ultrasonography Contrast media Retinal ganglion cells Gene transfer techniques |
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