| 摘 要： | 目的用小RNA干扰(siRNA)技术在体外研究其对人肝癌HepG2细胞的增殖及凋亡作用。方法将3组siRNA-VEGF-C质粒分别瞬时转染到HepG2细胞中,用qRT-PCR和免疫印迹法检测转染前后VEGF-C基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体用于后续实验;在后续实验将细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,siRNA-VEGF-C1组。通过噻唑蓝比色法(MTT)检测HepG2细胞增殖情况;Hoechst 33258染色法检测HepG2细胞核形态变化;流式细胞仪检测人肝癌HepG2细胞周期及凋亡的变化。结果各干扰组VEGF-C与空白对照组比较,基因和蛋白水平明显降低,siRNA-VEGF-C1抑制率最高达80.0%,用siRNA-VEGF-C1进行后续实验。siRNA-VEGF-C1组的生长曲线平坦,细胞生长率低于对照组。空白对照组、阴性对照组,siRNA-VEGFC1组的早期凋亡率分别是(0.25±0.09)%,(4.80±1.62)%,(20.10±3.41)%,siRNA-VEGF-C1组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。空白对照组、阴性对照组,siRNA-VEGF-C1组的G0/G1期细胞数分别是(62.28±3.28)%,(62.20±4.81)%,(76.46±4.69)%,siRNAVEGF-C1组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体能抑制VEGF-C的基因表达,并可抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。
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