苯并[a]芘与铅单独及联合作用对体外神经元存活率及胞核DNA损伤的影响

背景：苯并[a]芘对中枢神经和外周神经具有一定的损伤作用，苯并[a]芘与其他毒物联合神经毒作用的研究处于起始阶段。目的：应用分子生物学技术与神经元培养相结合的手段研究苯并[a]芘、铅单独及联合作用下对体外神经细胞的毒性及胞核DNA的损伤情况。设计：重复测量设计。单位：重庆医科大学劳动卫生教研室和华中科技大学同济医学院职业医学研究所热生物与分子毒理实验室。材料：实验于2003-06／09在华中科技大学同济医学院职业医学研究所热生物与分子毒理实验室完成，选择10只8日龄SD大鼠小脑组织制备原代细胞培养物，分10组培养，每组5个培养皿。按以下分组进行处理：①空白对照组。②溶剂对照组（等量二甲基亚砜＋肝微粒体酶混合物平行处理）。③低浓度铅染毒组（醋酸铅5μmol／L）。④高浓度铅染毒组（醋酸铅50μmol／L）。⑤低浓度苯并[a]芘染毒组（苯并[a]芘5μmol／L＋肝微粒体酶混合物）。⑥高浓度苯并[a]芘染毒组（苯并[a]芘50μmol／L＋肝微粒体酶混合物）。⑦低浓度铅＋低浓度苯并[a]芘联合染毒组。⑧低浓度铅＋高浓度苯并[a]芘联合染毒组。⑨高浓度铅＋低浓度苯并[a]芘联合染毒组。⑩高浓度铅＋高浓度苯并[a]芘联合染毒组。方法：染毒90min，胰酶消化法收集标本，椎虫蓝染色法检测各组细胞存活率；单细胞凝胶电泳法检测各组细胞胞核DNA的损伤情况。主要观察指标：苯并[a]芘、铅单独及联合染毒下体外神经细胞的存活率及胞核DNA的损伤率。结果：①两种浓度的苯并[a]芘、铅单独或联合染毒各组细胞存活率均低于对照组[染毒组为（44．14&;#177;4．80%～（82.40＋2．70）％，对照组为（88．44&;#177;2.53）％～（90．12&;#177;2.23％，P〈0．05～0．01]。②高浓度苯并[a]芘单独染毒组、低浓度铅＋高浓度苯并[a]芘染毒组、高浓度铅＋低浓度苯并[a]芘染毒组、高浓度铅＋高浓度苯并[a]芘染毒组胞核DNA损伤程度均高于对照组[63％（19／30），87％（26／30），80％（24/30），97％（29／30），13％（4／30），20％（6／30），P〈0．01]。结论：苯并[a]芘与铅均有一定的体外神经毒性，且二者有协同作用；苯并[a]芘损害体外培养神经元胞核DNA的能力大于铅。

Effects of benzo[a]pyrene and lead either in separation or in combination on neuronal survival rate and nuclear DNA damage in vitro