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小鼠Tim-3真核表达载体pTARGET-Tim-3的构建
引用本文:孟静,刘晓立,郭春,马春红.小鼠Tim-3真核表达载体pTARGET-Tim-3的构建[J].山东大学学报(医学版),2010,48(11):37-40.
作者姓名:孟静  刘晓立  郭春  马春红
作者单位:山东大学 1.第二医院检验科, 济南 250033; 2.第二医院肾移植科, 济南 250033;
3.医学院免疫学研究所, 济南 250012
基金项目:山东省科技厅攻关计划资助项目(2007GG30002028);山东省卫生厅青年基金资助项目(2007QZ011)。
摘    要:目的 构建小鼠Tim-3真核表达载体,并在黑色素瘤细胞系B16中表达小鼠TIM-3。方法 以脾细胞RNA为模板,逆转录PCR扩增鼠Tim-3编码区基因,T-A克隆至真核表达载体pTARGET,构建重组质粒pTARGET-Tim-3,采用脂质体转染法转染黑色素瘤细胞系B16细胞,以逆转录PCR和Western blot验证Tim-3在B16细胞中的表达。结果 利用酶切和测序的方法,筛选、鉴定pTARGET-Tim-3真核表达载体,转染黑色素瘤细胞系B16细胞,经逆转录PCR和Western blot证实TIM-3高效表达。结论 成功构建小鼠Tim-3真核表达载体, Tim-3在转染的小鼠B16细胞系中高表达。

关 键 词:基因  克隆,分子  DNA,重组  真核表达  小鼠  
收稿时间:2010-07-09

Construction of the mouse T cell immunoglobulin mucin 3(Tim-3)eukaryotic expression vector
MENG Jing,LIU Xiao-li,GUO Chun,MA Chun-hong.Construction of the mouse T cell immunoglobulin mucin 3(Tim-3)eukaryotic expression vector[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2010,48(11):37-40.
Authors:MENG Jing  LIU Xiao-li  GUO Chun  MA Chun-hong
Institution:1. Clinical Laboratory; 2. Department of Kidney Transplantation, The Second Hospital of  Shandong University, Jinan 250033, China;
3. Institute of Immunology, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China
Abstract:
Keywords:Genes  Cloning, molecular  DNA, recombinant  Eukaryotic expression  Mice
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