核因子-κB参与小鼠Hepcidin基因的转录调控

目的探讨核因子-κB（NFKB）参与Hepcidin基因急性时相表达转录调控的可能性及其分子机制。方法腹腔注射脂多糖（LPS）建立小鼠急性时相反应模型，检测Hepcidin表达与LPs的剂量效应和时间效应关系；电泳迁移率变动实验（EMSA）初步探讨NF-κB参与Hepcidin基因转录调控的可能性；构建NFicBp65亚基特异的小干扰RNA（siRNA）表达载体pAVU6＋27-NF-κB，DOTAP脂质体法瞬时转染小鼠原代肝细胞，观察NF-κB p65基因沉默后Hepcidin表达改变以及LPS诱导Hepcidin表达情况。结果Hepcidin表达与LPS注射剂量和时间呈正相关，50μg LPS注射后l0h，Hepcidin表达达到峰值。EMSA显示53～64bp位点出现明显的滞后带。NF-κBP65特异的SiRNA表达载体瞬时转染原代肝细胞后，基因沉默效率为50％～67％，转染细胞Hepcidin的表达水平明显下降，且并不能被LPS显著诱导。结论NF-κB参与Hepcidin转录调控，p65亚基是其上调Hepcidin基因表达的关键组分，53～64bp是p65亚基的作用位点。

Experimental study on transcription regulation of mouse hepcidin gene by NF-κB