| 结核分枝杆菌furB基因的克隆、表达和纯化 |
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| 引用本文： | 姜泓,薛莹,高雪,师长宏,柏银兰,张海,李元,徐志凯.结核分枝杆菌furB基因的克隆、表达和纯化[J].第四军医大学学报,2004,25(18):1641-1644. |
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| 作者姓名： | 姜泓 薛莹 高雪 师长宏 柏银兰 张海 李元 徐志凯 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的: 从H37Rv基因组中扩增furB并高效表达和纯化. 方法: 用PCR技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增furB序列,将其与pGEM-T-Easy载体连接转化E.coli DH5α,构建重组克隆载体pGEM-T-Easy/furB,测序正确后将目的基因片断克隆入pQE-80L原核表达载体并转化E.coli DH5α,IPTG诱导目的蛋白表达. 经Western blot鉴定目的基因与(His)6融合表达,将已表达的蛋白质通过Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化. 结果: PCR得到结核分枝杆菌furB,测序结果与Genbank中报道的完全一致. SDS-PAGE显示,在Mr为15.0×103处有相应的蛋白质表达条带,Western blot鉴定为(His)6融合表达蛋白. 经Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化后可得到纯化的蛋白. 结论: 成功克隆了铁调节蛋白基因furB序列,并在E.coli DH5α高效表达,亲和层析后获得了纯化目的蛋白.
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| 关 键 词： | furB 表达 纯化 结核分枝杆菌 |
| 文章编号： | 1000-2790(2004)18-1641-04 |
| 修稿时间： | 2004年5月20日 |
Cloning, expression and purification of Mycobacterium tuberculosis furB |
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| JIANG Hong,XUE Ying,GAO Xue,SHI Chang-Hong,BAI Yin-Lan,ZHANG Hai,LI Yuan,XU Zhi-Kai.Cloning, expression and purification of Mycobacterium tuberculosis furB[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2004,25(18):1641-1644. |
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| Authors: | JIANG Hong XUE Ying GAO Xue SHI Chang-Hong BAI Yin-Lan ZHANG Hai LI Yuan XU Zhi-Kai |
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| Institution: | JIANG Hong,XUE Ying,GAO Xue,SHI Chang-Hong,BAI Yin-Lan,ZHANG Hai,LI Yuan,XU Zhi-Kai Department of Microbiology,School of Basic Medicine,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | furB |
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