海藻糖对生物人工肝用人永生化肝细胞系C3A细胞低温保存的实验研究

背景：随着生物人工肝在临床上的应用，需要有一种方便、有效、实用的保护生物反应器装载细胞活力及功能的方法，设计有自主知识产权的生物人工肝用肝细胞的低温保护液迫在眉梢。目的：验证海藻糖作为低温保护剂在4℃低温保存肝细胞的作用。方法：采用C3A人永生化肝细胞系在不同低温保存液(DMEM培养液;乳酸钠林格氏液，加有不同浓度海藻糖的乳酸钠林格氏液;UW液) 4℃保存24h、48h 及72h。复苏后行细胞活力、细胞损伤指标、氧自由基代谢相关指标等检测，并通过荧光双染法观察细胞凋亡情况。结果：不同低温保存液保存不同时间的C3A细胞的活力、细胞损伤及细胞凋亡表现均有所不同,其中在同时间点不同浓度海藻糖组均优于单用乳酸钠林格氏液组,但不如UW液组（P<0.01）。而保存24h的不同浓度海藻糖组及UW液组与乳酸钠林格氏液组相比无显著性差异（P>0.05），结论：海藻糖能有效减轻低温对肝细胞凋亡及缺血再灌注损伤的程度，因此，可成为低温保存液中有效及重要的保护剂组分。

Empirical Study of Hypothermically Preserved C3A hepatocytes Using Trehalose