| 人骨形态发生蛋白-2基因转染兔骨髓基质干细胞及其表达 |
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| 引用本文： | 邹德波,周东生,王永会,王来城,武兴国,黄涛.人骨形态发生蛋白-2基因转染兔骨髓基质干细胞及其表达[J].中华创伤骨科杂志,2006,8(2):148-152. |
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| 作者姓名： | 邹德波 周东生 王永会 王来城 武兴国 黄涛 |
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| 作者单位： | 250021,济南,山东省立医院骨科 |
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| 基金项目： | 山东省科学技术发展计划项目(023130110)~~ |
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| 摘 要： | 目的探讨含有人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)cDNA的真核表达载体在兔骨髓基质干细胞(MSCs)中的转录及表达情况,为进一步进行多基因转染MSCs复合纳米仿生骨治疗骨缺损实验提供材料。方法用电穿孔方法将真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2转染至兔MSCs中,荧光显微镜及流式细胞学检查观察转染效果、检测转染效率,定量RT-PCR方法观察hBMP-2cDNA在兔MSCs中的转录情况,免疫组织化学及westernblot方法检测hBMP-2蛋白表达情况,ALP活性定量测定检测hBMP-2蛋白功能。结果电穿孔方法将重组质粒转染至兔MSCs中,荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪检测转染效率为(42.7±2.1)%,转染24h后定量RT-PCR方法检测到hBMP-2cDNA在兔MSCs中的转录片断,免疫组织化学观察到hBMP-2蛋白呈强阳性表达,westernblot方法可见18KDhBMP-2蛋白条带,转染组细胞ALP活性明显提高(P>0.05)。结论pIRES2-EGFP-hBMP2通过电穿孔方法导入兔MSCs,并在其中有效表达,发挥生物学作用。
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| 关 键 词： | 人骨形态发生蛋白-2 骨髓基质干细胞 基因转染 表达 |
| 收稿时间： | 01 15 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年1月15日 |
Expression and mechanism of cDNA of human bone morphogenetic protein 2 via eukaryotic expression vector in rabbit mesenchymal stem cells |
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| ZOU De- bo,ZHOU Dong- sheng,WANG Yong- hui,et al..Expression and mechanism of cDNA of human bone morphogenetic protein 2 via eukaryotic expression vector in rabbit mesenchymal stem cells[J].Chinese Journal of Orthopaedic Trauma,2006,8(2):148-152. |
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| Authors: | ZOU De- bo ZHOU Dong- sheng WANG Yong- hui |
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| Institution: | ZOU De- bo,ZHOU Dong- sheng,WANG Yong- hui,et al. Department of Orthopaedics,Shandong Provincial Hospital,Shandong University,Jinan 250021,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human bone morphogenetic protein 2 (hBMP- 2) Mesenchymal stem cells(MSCs) Gene transfection Expression |
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