| 乙型肝炎病毒Ⅹ蛋白对原代小鼠肝细胞周期的影响 |
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| 引用本文： | 蔡园,何松,罗娜,罗莉,龚倩. 乙型肝炎病毒Ⅹ蛋白对原代小鼠肝细胞周期的影响[J]. 中华肝脏病杂志, 2012, 20(3) |
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| 作者姓名： | 蔡园 何松 罗娜 罗莉 龚倩 |
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| 作者单位： | 400010,重庆医科大学附属第二医院消化内科 |
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| 基金项目： | 重庆市卫生局医学科研计划项目重点项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨HBV复制过程中HBx蛋白对原代小鼠肝细胞周期的影响. 方法 采用原代小鼠肝细胞为研究系统,用野生型HBV质粒(pHBV)和HBx蛋白表达缺失的HBV质粒(pHBV△X)分别转染细胞.Western blot检测细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin E、cyclin A及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p16 (p16)、p21的表达水平；实时荧光定量PCR和Southern blot检测HBVDNA复制水平.两组之间比较用两样本均数t检验,多样本均数间的比较用方差分析及q检验. 结果 新分离肝细胞和原代培养24、48、72 h肝细胞的细胞周期蛋白表达水平无明显差异；转染48 h后,pHBV组细胞与pHBV△X组细胞周期蛋白条带灰度值相比,前者cyclin D1、p21、cyclin E表达量较高,p16的表达量较低,统计量t值分别为15.713,22.897,14.680,-19.584,P值均＜0.05.培养72 h后提取HBV DNA,Southem blot检测HBV DNA复制中间体松散环状DNA、双链线性DNA、单链DNA的水平,经条带灰度扫描,pHBV组的水平(分别为3288.336±448.011、6458.318±182.163、2760.613±393.561)明显高于pHBV△X组(分别为515.721±62.530、2122.228±28.347、1632.013±207.021)及空白对照组,P值均＜0.05；实时荧光定量PCR检测HBV DNA复制水平,pHBV组[每个细胞(987.50±47.80)拷贝]也明显高于pHBV△X组[每个细胞(303.67±33.94)拷贝],t=20.203,P＜0.05.结论 HBx蛋白能通过调节细胞周期中各蛋白的表达,使细胞由静止期(G0)进入DNA合成前期(G1)并停滞于G1期,从而促进HBV的复制.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒,乙型 转染 小鼠 肝细胞 细胞周期蛋白质类 HBx蛋白 |
Effect of hepatitis B virus X protein on the cell cycle of primary mouse hepatocytes |
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| CAI Yuan , HE Song , LUO Na , LUO Li , GONG Qian. Effect of hepatitis B virus X protein on the cell cycle of primary mouse hepatocytes[J]. Chinese journal of hepatology, 2012, 20(3) |
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| Authors: | CAI Yuan HE Song LUO Na LUO Li GONG Qian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus Transfection Mice Hepatocytes Cell cycle proteins Hepatitis B virus X protein |
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