沉默NF-κB p65基因下调TNF-α诱导的肺泡上皮细胞的炎症反应 |
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引用本文: | 吴炜景,李跃飞,李理,李伟峰,黄文杰.沉默NF-κB p65基因下调TNF-α诱导的肺泡上皮细胞的炎症反应[J].免疫学杂志,2012(1):24-28. |
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作者姓名: | 吴炜景 李跃飞 李理 李伟峰 黄文杰 |
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作者单位: | 南方医科大学研究生院;广州军区广州总医院呼吸内科;广州军区机关门诊部 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81070003) |
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摘 要: | 目的建立急性肺损伤体外细胞炎症模型,探讨NF-κB p65基因沉默减轻细胞炎症、保护肺结构细胞的可行性。方法以TNF-α(10 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),运用RNA干扰技术沉默NF-κB p65基因,采用RT-PCR及Westernblotting法检测沉默效率,ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10等炎症因子浓度。结果 TNF-α刺激A549细胞可在基因水平上调NF-κB p65的表达,并增加NF-κB蛋白的核转位,上调细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10的浓度;预转染NF-κB p65 siRNA可在基因水平及蛋白水平有效沉默NF-κB p65表达,降低上述各炎症因子浓度(P<0.05)。结论急性肺损伤体外细胞炎症模型构建成功,RNA干扰技术能有效沉默该模型NF-κB p65基因,下调炎症反应水平,保护肺泡上皮细胞,为急性肺损伤免疫调控机制的研究和基因靶向治疗提供实验依据。
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关 键 词: | 核因子κB RNA干扰 细胞因子 A549细胞 |
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