| 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与松弛环状DNA对核苷(酸)类药物耐药变异的比较 |
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| 引用本文： | 陈建山,徐文胜,赵克开,倪武,缪晓辉. 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与松弛环状DNA对核苷(酸)类药物耐药变异的比较[J]. 中华传染病杂志, 2012, 30(1) |
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| 作者姓名： | 陈建山 徐文胜 赵克开 倪武 缪晓辉 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学附属长征医院感染科,上海,200003
2. 山东省威海市解放军第四○四医院感染科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 了解肝细胞内HBV共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)核苷(酸)类药物耐药变异的情况,并比较其与松弛环状DNA(rcDNA)耐药变异的异同.方法 取40例慢性HBV感染肝移植患者的部分肝组织,采用十二烷基硫酸钠-蛋白质沉淀法结合DNA提取试剂盒分离提取肝内的HBV cccDNA和rcDNA.将抽提产物用不降解质粒的ATP依赖DNA酶酶切纯化后,用跨HBV基因组双链缺口并涵盖常见核苷类耐药位点(rt169～rt250)的引物行单轮PCR或套式PCR选择性扩增cccDNA.另用不跨双缺口的引物PCR扩增肝组织内的HBV rcDNA和患者肝移植术前的血清HBV rcDNA.用直接测序法对上述扩增产物进行基因测序并分析核苷(酸)类药物耐药位点的检出情况.结果 40例患者中,31例肝组织内检测到HBV cccDNA,35例肝组织检测到HBV rcDNA,21例肝移植术前血清中检测到HBV rcDNA.测序结果显示,2例肝组织内cccDNA、rcDNA和血清rcDNA均检测到rtM204Ⅰ变异；有2例患者肝内cccDNA、rcDNA分别存在rtM204Ⅰ、rtQ215H变异,而血清rcDNA未检测到相应变异；3例血清中分别存在rtM204V、rtM204V、rtV173L+ rtL180M+rtM204V变异,而肝内cccDNA和rcDNA未检测到相应变异.结论 慢性HBV感染者肝细胞内cccDNA可出现核苷(酸)类药物耐药变异,且肝组织内的cccDNA、rcDNA耐药变异株与血清中的rcDNA耐药变异株不完全一致.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 乙型 DNA,环状 核苷酸类 抗药性,病毒 变异(遗传学) |
Comparison of drug resistance mutations associated with hepatitis B virus covalently closed circular DNA and relaxed circular DNA |
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| CHEN Jian-shan , XU Wen-sheng , ZHAO Ke-kai , NI Wu , MIAO Xiao-hui. Comparison of drug resistance mutations associated with hepatitis B virus covalently closed circular DNA and relaxed circular DNA[J]. Chinese Journal of Infectious Diseases, 2012, 30(1) |
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| Authors: | CHEN Jian-shan XU Wen-sheng ZHAO Ke-kai NI Wu MIAO Xiao-hui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus DNA,circular Nucleosides Drug resistance,viral Variation(genetics) |
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