lncRNA XIST靶向miR-302a-3p对IL-1β诱导软骨细胞损伤的调控机制

目的 探讨lncRNA X染色体失活特异转录因子（XIST）靶向miR-302a-3p对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导软骨细胞损伤的调控机制。方法 SW1353细胞分为Control组、IL-1β组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+si-XIST组、IL-1β+si-PDK1组、IL-1β+si-XIST+miR-NC inhibitor组、IL-1β+si-XIST+miR-302a-3p inhibitor组。检测XIST、miR-302a-3p以及3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）mRNA表达；噻唑蓝（MTT）实验测定细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡；qRT-PCR检测炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10）水平；双荧光素酶报告基因检测实验证实miR-302a-3p与XIST或PDK1的靶向关系；免疫印迹法检测凋亡蛋白（Bcl-2、Bax）及PDK1蛋白表达。结果 与IL-1β组相比，IL-1β+si-XIST组XIST表达下调，细胞活力升高，凋亡率降低，Bax表达及TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降，Bcl-2表达及IL-4、IL-10水平升高（P<0.05）。XIST直接靶向下调miR-302a-3p表达，miR-302a-3p下调可恢复si-XIST介导的促增殖、抗凋亡和炎症反应作用（P<0.05）。PDK1是miR-302a-3p的靶基因，沉默PDK1可抑制细胞的炎症反应（P<0.05）。结论 敲低XIST可提高IL-1β诱导软骨细胞的细胞活力，减轻OA样软骨细胞损伤，其作用机制与靶向上调miR-302a-3p进而抑制PDK1表达有关。