| 干细胞脑内移植有效标记研究:绿色荧光蛋白质粒标记的应用价值 |
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| 引用本文： | 关云谦,陈彪,刘平,邹春林,张愚.干细胞脑内移植有效标记研究:绿色荧光蛋白质粒标记的应用价值[J].中国组织工程研究与临床康复,2004,8(13):2506-2508. |
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| 作者姓名： | 关云谦 陈彪 刘平 邹春林 张愚 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所神经生物学室,北京市,100053;首都医科大学北京宣武医院,神经内科,北京市,100053
2. 首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所细胞治疗中心,北京市,100053 |
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| 基金项目： | 国家973项目(001CB510104)，北京市科委科技计划项目(H020220010290)，北京市卫生局重点学科项目(1998)卫科扶字12号~~ |
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| 摘 要： | 目的:观察绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)质粒转化小鼠胚胎干细胞(embryonicstemcell,ESC)的效果,以及将转化的胚胎干细胞移植入正常大鼠纹状体后,GFP质粒作为细胞存活情况示踪剂的效果。方法:首先利用感受态大肠杆菌提取大量高纯度GFP质粒DNA,然后将GFP质粒与脂质体孵育形成的转化复合物和小鼠胚胎干细胞共同孵育,使GFP质粒转入胚胎干细胞;筛选表达GFP的胚胎干细胞。将筛选后表达GFP的ESC移植入活体大鼠纹状体内,移植21d后,观察表达绿色荧光蛋白的移植细胞的存活情况。结果:GFP质粒转化以后的ES细胞团和单细胞都表达亮绿色的GFP,细胞打散计数证实大约60%的细胞携带GFP,移植21d后,大鼠脑内可见大量表达GFP的移植细胞。结论:脂质体可以将GFP质粒转入鼠的胚胎干细胞,携带有GFP的ES移植后21d,GFP可以作为示踪剂观察移植细胞的存活状况。脂质体辅助的GFP质粒转化胚胎干细胞是移植示踪的较好方法。
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| 关 键 词： | 干细胞 胚胎/细胞学 神经元 神经胶质原纤维酸性蛋白质 星形细胞 |
| 文章编号： | 1671-5926(2004)13-2506-03 |
| 修稿时间： | 2004年2月27日 |
Effective labeling of stem cell transplantation in vivo:the application value of green fluorescent protein plasmid labeling |
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