不同针灸方法对KOA模型大鼠软骨损伤生物标志物MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响

摘要：目的：观察比较不同针灸方法对KOA模型大鼠MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响。方法：将体重180-200g的SPF级雄性SD大鼠50只，适应性饲养7天后随机分为正常组（N）、模型组（M）、温针组（W）、电针组（D）、手针组（S）五组，每组10只。N组不作任何处理，其余四组腹腔注射戊巴比妥钠（1%，0.04ml/g）麻醉后，1mg单碘乙酸盐（MIA）溶于50μL 9%的无菌生理盐水，右膝关节注射造模，周期14天，造模前后进行行为学Lequesne MG评分检测。N、M组不作任何干预，其余三组对鹤顶、阳陵泉穴分别进行针刺、电针、温针干预，手针组0.25*25mm针灸针，刺入约5mm平补平泻手法，200 r/min，1min，留针20 min，10 min行针1次；电针组平补平泻后接电针，疏波，1mA，2Hz，20min/次；温针组平补平泻后，将直径5mm艾柱置于针柄，20min/次；三组均隔天干预，共28天。干预前后进行行为学机械刺激回缩阈值检测，28天后戊巴比妥钠麻醉，生理盐水心脏灌注取关节软骨和关节进行Western blot、免疫组化检测。结果：行为学Lequesne MG评分检测显示，造模前各组大鼠膝关节评分差异无统计学意义（P>0.05），造模后除N组外，其余四组评分显著高于造模前，差异有统计学意义（P<0.05）。机械刺激回缩阈值检测显示，干预前M、W、D、S组与N组相比回缩阈值均降低，其结果有统计学意义（P<0.05）。干预后D组较M组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测关节软骨显示，MMP-1阳性表达M组较N组升高（P<0.05），D、W、S组较M组降低（P<0.05）；D组较W组降低（P<0.05），MMP-3阳性表达M组较N组升高（P<0.05），D、W、S组较M组降低（P<0.05），D组较S、W组降低（P<0.05）；T1MP-1阳性表达N、M、W、S组较D组降低，差异具有统计学意义（P<0.05），S组较M组升高（P<0.05）。Western blot检测软骨显示，MMP-1蛋白表达M组较N组升高（P<0.05），D、W、S组较M组降低（P<0.05），W组较D组升高（P<0.05）；MMP-3蛋白表达M组较N组升高（P<0.05），D、S组较M组降低（P<0.05）；T1MP-1蛋白表达D、S、W组较M组升高（P<0.05）。其余结果无统计学意义（P>0.05）。结论：电针、温针、手针三种方法可有效改善KOA模型大鼠关节软骨损伤，可能通过升高TIMP-1的表达从而降低MMP-1、MMP-3的表达，相比之下电针更有利于调节上升TIMP-1且抑制MMP-1、MMP-3的表达，手针方法次之，温针效果则略逊于前两者。