| APP基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的稳定表达 |
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| 引用本文： | 孙立伟,姜锐. APP基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的稳定表达[J]. 中国老年学杂志, 2010, 30(23) |
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| 作者姓名： | 孙立伟 姜锐 |
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| 作者单位： | 北华大学生命科学研究中心,吉林,吉林,132013 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目，吉林省科技发展计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建淀粉样前体蛋白(APP)基因真核表达载体,转染SH-SY5Y细胞,建立稳定转染细胞系.方法 从质粒pcDNAs-APP中经PCR扩增出APP基因,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染SH-SY5Y细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,通过印迹法(Western blot)检测APP的表达. 结果 pcDNA3.1(+)-APP重组体经PCR扩增后片段大小约为2 300 bp,与预期相同.测序结果与目的序列相同,重组体载体构建成功.Western印迹检测到SH-SY5Y细胞中APP的表达. 结论 成功构建pcDNA3.1(+)-APP真核表达载体并稳定转染SH-SY5Y细胞,成功表达了目的基因,为进一步研究阿尔茨海默病分子学机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 真核表达载体 阿尔茨海默病 |
Construction the eukaryotic expression vector of Amyloid beta-protein precursor and its stable expression in SH-SY5Y cell line |
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| SUN Li-Wei,JIANG Rui. Construction the eukaryotic expression vector of Amyloid beta-protein precursor and its stable expression in SH-SY5Y cell line[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2010, 30(23) |
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| Authors: | SUN Li-Wei JIANG Rui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | APP |
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