| 实时荧光定量PCR检测淋巴细胞中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B基因的表达 |
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| 作者姓名： | Zhao WX Yang JL Li X Ai J Li T Wang L |
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| 作者单位： | 成都军区昆明总医院病理科,云南,昆明,650032 |
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| 基金项目： | 云南省后备人才基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立可用于测定淋巴细胞免疫功能的SYBRGreen I实时荧光定量PCR技术。方法:根据NCBI基因库中4种基因(NKG2D、穿孔素、颗粒酶B和内参照GAPDH)的序列,设计合成相应的引物,扩增上述基因。建立SYBRGreen I实时荧光定量PCR方法,检测肿瘤患者外周血淋巴细胞和诱导培养的患者CIK细胞(cytokine induced killer,CIK)中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B mRNA的含量。结果:应用设计的引物扩增NKG2D、穿孔素和颗粒酶B基因后,经琼脂糖凝胶电泳和溶解曲线分析表明具有特异性。SYBR Green I实时荧光定量PCR检测结果表明,肿瘤患者的淋巴细胞中颗粒酶B基因的表达降低,而经细胞因子和单克隆抗体诱导培养的肿瘤患者CIK细胞与其淋巴细胞相比,细胞中穿孔素和颗粒酶B基因的表达明显增加(P0.01)。结论:该SYBRGreen I实时荧光定量PCR方法可用于检测淋巴细胞中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B的mRNA的表达、作为研究淋巴细胞免疫功能的有力手段。
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| 关 键 词： | 实时荧光定量PCR 细胞免疫 穿孔素 颗粒酶B |
The quantitative detection of NKG2D, perforin and granzyme B gene expressions in lymphocytes by SYBR green I real-time fluorescence quantitative PCR |
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| Zhao WX,Yang JL,Li X,Ai J,Li T,Wang L.The quantitative detection of NKG2D, perforin and granzyme B gene expressions in lymphocytes by SYBR green I real-time fluorescence quantitative PCR[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2010,26(11):1108-1110. |
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| Authors: | Zhao Wen-xing Yang Ju-lun Li Xia Ai Jin Li Tao Wang Li |
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| Institution: | Department of Pathology, Kunming General Hospital of Chengdu Command, Kunming 650032, China. wenxing-zhao@sohu.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NKG2D |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录！ |
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