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嗅鞘细胞培养液对海仁藻酸损伤脊髓神经元一氧化氮产生的影响
引用本文:杨浩,李静雯,罗娜,游思维,鞠躬.嗅鞘细胞培养液对海仁藻酸损伤脊髓神经元一氧化氮产生的影响[J].中华神经医学杂志,2005,4(12):1189-1193.
作者姓名:杨浩  李静雯  罗娜  游思维  鞠躬
作者单位:710032,西安,第四军医大学全军神经科学研究所
基金项目:国家自然科学基金(30371466)
摘    要:目的研究嗅鞘细胞培养液(OECCM)对海仁藻酸(KA)损伤后原代培养脊髓神经元的作用,进一步探讨其保护的作用机理。方法采用原代细胞培养法,分别培养了胚胎小鼠脊髓神经元和成年大鼠的嗅神经鞘细胞(OECs),收集OECCM。通过给予KA建立体外的损伤模型,KA分别作用6,8,12h后,加入OECCM继续培养24 ̄36h。然后进行抗神经元型一氧化氮合酶(ncNOS)免疫细胞化学染色,观察细胞ncNOS表达情况,并对各组ncNOS阳性神经元数目进行统计,同时运用四唑盐(MTT)比色法检测神经细胞活性;最后对不同组的一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞染色情况、阳性细胞数目和细胞活性进行比较。结果KA作用后,一氧化氮(NO)都出现异常表达,但与实验组(OECCM干预组)相比,OECCM处理组NO表达水平明显低于单纯KA损伤组。OECCM处理组NOS阳性细胞数目(6h组,34.3±5.25;8h组,40.6±3.68),明显低于对照组(6h组,42.3±3.48;8h组,54.5±6.30)(P<0.01),在KA损伤12h时,两组NOS阳性细胞数(52.3±5.23vs61.32±6.45)(P<0.05);而细胞活性(6h,0.372±0.034;8h,0.312±0.026)明显高于对照组(6h,0.283±0.041;8h,0.219±0.033)(P<0.01),12h时两组细胞活性没有明显差异(0.199±0.012vs0.202±0.032)(P>0.05)。结论OECCM中可能含有一些保护脊髓神经元免遭KA损伤的因子,这些因子可能在参与抑制NOS异常表达起了重要作用。

关 键 词:嗅鞘细胞  海仁藻酸  细胞培养  脊髓  一氧化氮
文章编号:1671-8925(2005)12-1189-005
收稿时间:2005-06-14
修稿时间:2005年6月14日

Effects of culture supernatant of olfactory ensheathing cells culture medium on nitric oxide production of neurons from spinal cord in vitro after kainic acid excitotoxic injury
YANG Hao,LI Jing-wen,LUO Na,YOU Si-wei,JU Gong.Effects of culture supernatant of olfactory ensheathing cells culture medium on nitric oxide production of neurons from spinal cord in vitro after kainic acid excitotoxic injury[J].Chinese Journal of Neuromedicine,2005,4(12):1189-1193.
Authors:YANG Hao  LI Jing-wen  LUO Na  YOU Si-wei  JU Gong
Abstract:
Keywords:Olfactory ensheathing cells  Kainic acid  Cell culture  Spinal cord  Nitric oxide
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