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PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较
引用本文:赖小敏,方国源,李彩霞.PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较[J].中山大学学报(医学科学版),1999,20(2).
作者姓名:赖小敏  方国源  李彩霞
作者单位:中山医科大学微生物学教研室
摘    要:目的:检测细胞培养中支原体的污染,建立支原体通用的PCR方法。方法:根据已出版的序列设计并合成一对支原体(柔膜体纲)16SrRNA基因组特异引物。对实验室所存的12种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了PCR扩增。以PCR与分离培养比较检测了33份细胞培养标本。结果:12种支原体均出现了约620bp左右的特异性扩增带,敏感性为100~1000个支原体细胞,且常见的6种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被HindⅢ切成280与340bp左右的2条带。理论上推测这对引物可扩增所有支原体16SrDNA。但对大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞等未见有扩增带出现。在对33份细胞培养标本的检测中,除PCR和分离培养同时检出2份阳性外,前方法还另检出阳性3份。5份PCR扩增物均被HindⅢ切出2条带。结论:PCR较分离培养敏感性高,可提高细胞培养污染支原体的检出率,防止出现假阴性结果;如做好质量控制,对于一般实验室检测细胞培养支原体污染,PCR扩增较分离培养具有更大的应用意义

关 键 词:细胞,培养的  支原体  污染  16SrRNA  聚合酶链反应

PCR Versus Cultivation for the Detection of Mycoplasma Contamination in Cell Cultures
Lai Xiaomin,Fang Guoyuan,Li Caixia,Wang Chuanen.PCR Versus Cultivation for the Detection of Mycoplasma Contamination in Cell Cultures[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),1999,20(2).
Authors:Lai Xiaomin  Fang Guoyuan  Li Caixia  Wang Chuanen
Abstract:
Keywords:cells  cultured  mycoplsma  contamination  16S rRNA  polymerase chain reaction  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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