基于ＴａｑＭａｎ探针三重荧光ＰＣＲ 检测沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌

摘要：目的　建立基于ＴａｑＭａｎ探针三重荧光ＰＣＲ 检测沙门菌（狊犪犾犿狅狀犲犾犾犪，Ｓａ）、肠炎沙门菌（ＳＥ）和鼠伤寒沙门菌（ＳＴ） 的方法。方法　根据沙门菌犪犮犲犃基因、肠炎沙门菌特异序列（ＧｅｎＢａｎｋ：ＡＦ３７０７０７．１）、鼠伤寒沙门菌的ＳＴＭ４５９９ 序列（ＧｅｎＢａｎｋ：ＡＥＲＶ０１００００２３．１），分别设计引物和ＴａｑＭａｎ探针，在探针的５′端分别标记ＦＡＭ、ＶＩＣ、ｃｙ５，建立基于ＴａｑＭａｎ探针三重实时荧光ＰＣＲ 检测沙门菌的方法。结果　２９ 种不同血清型沙门菌均扩增出犪犮犲犃基因，肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的引物和探针分别特异性地扩增出１５株肠炎沙门菌和１１株鼠伤寒沙门菌，而其他血清型沙门菌和１７株非沙门菌扩增结果阴性。犪犮犲犃、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌的三重荧光ＰＣＲ 扩增效率分别为８９％、８７％、９０％，最低检测浓度分别达到２８０ｃｆｕ／ｍｌ、２６０ｃｆｕ／ｍｌ、３００ｃｆｕ／ｍｌ。结论　本研究建立的方法特异性好、灵敏度高，可用于食品中沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的特异性检测。