养阴清热祛湿方及其拆方抑制人肺腺癌细胞A 549 PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号转导的研究

目的:通过观察养阴清热祛湿方(H)及其拆方(Y,R,Q,YR,YQ,RQ)对肺腺癌细胞A 549增殖抑制和PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号转导通路的影响,研究肺腺癌发病和PDGFRα-PLC-γ1-PKCα转导通路的关系.方法:采用人肺腺癌A 549细胞为实验对象,筛选出有效的药物,用正交试验优选出疗效最好的方剂,设对照组和养阴清热祛湿全方及其六个拆方处理细胞,用Western blot检测A 549细胞PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号转导通路各蛋白表达的影响.结果:①养阴清热祛湿全方及其拆方均能抑制A 549细胞的生长,全方作用最强,随药物浓度的增加,对细胞生长抑制呈现剂量-效应依赖关系.②人肺腺癌A 549细胞可检测到PDGFRα、PLC-γ1、PKCα蛋白分子的过度表达.③当用IC50药物剂量处理细胞时,养阴清热祛湿全方及其拆方均能抑制PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号通路各蛋白表达水平,其作用强弱依次为:H＞RQ＞YR＞YQ＞R＞Q＞Y.结论:①养阴清热祛湿全方及其拆方均能明显抑制人肺腺癌细胞A 549的生长,全方组效果最好,表明养阴、清热、祛湿三法联用具有协同作用.②肺腺癌发病和PDGFRα-PLC-γ1-PKCα转导通路信号增强密切相关.③养阴清热祛湿全方及其拆方均能下调A 549细胞PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号通路各蛋白表达水平,表明养阴、清热、祛湿及三法联用正是通过抑制PDGFRα-PLC-γ1-PKCα信号转导途径而抑制肺腺癌细胞增殖.④肺腺癌治疗中应以养阴清热祛湿为治疗大法,扶正祛邪,虚实同治.