基于血清代谢组学和流式细胞术探讨百药煎不同炮制品及其复方治疗溃疡性结肠炎作用机制

目的 通过比较百药煎不同炮制品及其复方香梅丸对溃疡性结肠炎（UC）大鼠的药效学与代谢组学差异，探讨其治疗UC的潜在作用机制。方法 80只SD大鼠适应性饲养3 d，随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组（0.4 g·kg^-1），百药煎组（1.89 g·kg^-1）、焦百药煎组（1.89 g·kg^-1）、百药煎炭组（1.89 g·kg^-1）、香梅丸低、高剂量组（1.89、5.67 g·kg^-1），每组10只。空白组灌胃给予生理盐水，其余7组每日灌胃给予5%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液5 mL，连续给药8 d，诱导UC模型。造模完成后，各给药组分别灌胃给予相应剂量药液，空白组和模型组灌胃等量生理盐水，连续给药8 d。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-10、IL-1β水平；苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化；流式细胞仪检测各组大鼠外周血中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）比例；利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）检测大鼠血清代谢物，结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对差异代谢物进行表征，根据变量重要性投影（VIP）值>1.0且P<0.05筛选差异代谢物，根据人类代谢组数据库（HMDB）分析潜在代谢通路。结果 与空白组比较，模型组结肠组织充血，黏膜可见溃疡，结肠长度显著降低（P<0.01），质量明显升高（P<0.05），外周血中Th17/Treg比例明显升高，血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显升高，IL-10水平明显降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，各给药组UC大鼠结肠组织病理均有改善，散在溃疡，炎性细胞浸润减少，结肠长度明显升高，质量明显降低（P<0.05），外周血中Th17/Treg比例明显降低，血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显降低（P<0.05，P<0.01），IL-10水平显著升高（P<0.01）。不同给药组治疗UC效果为香梅丸高剂量组>香梅丸低剂量组>百药煎炭组>焦百药煎组>百药煎组。代谢组学结果共筛选出26个差异代谢物，与空白组比较，模型组中有14个代谢物上调，5个代谢物下调，百药煎组、焦百药煎组、百药煎炭组、香梅丸低、高剂量组可分别回调14、9、14、12、17个代谢物。主要涉及柠檬酸盐循环通路、泛酸和辅酶A生物合成通路、芳香烃受体（AhR）信号通路、糖酵解/糖异生通路等代谢通路。结论 百药煎炒炭后治疗UC效果明显提高，与白芷和乌梅炭配伍后疗效更加突出，可为百药煎复方制剂的开发提供依据。

Exploring Mechanism of Different Processed Products of Baiyaojian and Its Formula in Treating Ulcerative Colitis Based on Serum Metabolomics and Flow Cytometry