实验动物前庭感觉毛细胞的定量观察

目的 测量常用实验动物内耳前庭感觉区的实际面积和量化分析前庭各个感觉区的毛细胞总数或密度。方法 ①制作CBA/CaJ小鼠、裸鼠、SD大鼠、豚鼠、南美栗鼠、新西兰白兔和非洲黑长尾猴的球囊斑铺片和椭圆囊斑铺片及壶腹嵴铺片,所有铺片样品来自每种受试动物的6个颞骨，在放大100倍的光学显微镜下拍摄2个囊斑铺片的整体照片；②应用Image J软件的图像测量程序，测量了上述7种常用实验动物球囊斑和椭圆囊斑的实际面积；③用网格将球囊斑铺片和椭圆囊斑铺片照片上的前庭感觉区划分为一个个方块区域。在放大400倍的光学显微镜下准确计数每个方格内的毛细胞数量，然后将每个方格的毛细胞计数结果相加以获得每种受试动物球囊斑和椭圆囊斑上的毛细胞总数；④应用前庭小视野定量观察技术计算出前庭各个感觉区小视野范围内的毛细胞密度。结果 ①从小鼠、裸鼠、大鼠、豚鼠、南美栗鼠、白兔到猴的球囊斑面积依次为(0.193±0.009)、(0.216±0.008)、(0.323±0.010)、(0.528±0.035)、(0.687±0.065)、(1.237±0.075)、(1.371±0.032)mm²；椭圆囊斑的面积依次为(0.193±0.020)、(0.208±0.013)、(0.321±0.011)、(0.526±0.034)、(0.795±0.017)、(1.224±0.082)、(1.388±0.048)mm²；②从小鼠、裸鼠、大鼠、豚鼠、南美栗鼠、白兔到猴的球囊斑毛细胞的总数依次为(2476.3±64.4)、(2389.8±47.8)、(3135.3±191.6)、(4882.2±208.7)、(6128.5±242.9)、(10572.2±464.4)、(10992.7±397.4)个；椭圆囊斑毛细胞的总数依次为(2491.4±54.8)、(2368.0±46.1)、(3218.8±82.9)、(4925.3±271.1)、(7794.0±386.1)、(11347.4±435.7)、(11114.5±410.6)个；③从小鼠、大鼠、豚鼠、南美栗鼠、白兔和猴的球囊斑微纹区和周边区的毛细胞密度(毛细胞数量/0.007mm²)依次为101.0±5.79(微纹区)/120.8±4.15(周边区)，95.5±3.91(微纹区)/109.2±5.26(周边区)，78.4±6.54(微纹区)/94.8±4.38(周边区)，60.0±4.74(微纹区)/84.6±2.61(周边区)，57.2±3.83(微纹区)/80.0±3.54(周边区)，53.8±4.21(微纹区)/68.0±4.18(周边区)。从小鼠、大鼠、豚鼠、南美栗鼠、白兔和猴的椭圆囊斑微纹区和周边区的毛细胞密度(毛细胞数量/0.007mm²)依次为103.8±5.02(微纹区)/119.2±3.70(周边区)，91.2±2.49(微纹区)/106.4±4.16(周边区)，74.1±3.54(微纹区)/90.8±3.56(周边区)，60.4±4.98(微纹区)/81.6±2.07(周边区)，57.8±1.92(微纹区)/77.8±3.70(周边区)，54.0±2.74(微纹区)/66.4±2.51(周边区)。从小鼠、大鼠、豚鼠、南美栗鼠、白兔和猴的壶腹嵴毛细胞密度(毛细胞数量/0.007mm²)依次为112.4±6.38，105.5±3.51，95.2±3.42，84.0±7.16，78.2±2.86，70.8±2.39。可见由于体型较小动物毛细胞的细胞体比体型较大动物毛细胞的细胞体小，因而体型较小动物的前庭毛细胞密度高于体型较大动物的前庭毛细胞密度。另外，每种实验动物球囊斑和椭圆囊斑微纹区的毛细胞密度相似，周边区的毛细胞密度也大致相同，但是同种实验动物囊斑微纹区的毛细胞密度却低于周边区的毛细胞密度。此外，壶腹嵴毛细胞的密度与球囊斑和椭圆囊斑周边区的毛细胞密度几乎相同。鉴于某些损害因素往往具有选择性破坏囊斑微纹区毛细胞的表现，因此囊斑微纹区的毛细胞密度应该与囊斑周边区的毛细胞密度区分开来进行统计，必要时甚至需要把Ⅰ型毛细胞和Ⅱ型毛细胞也区分开来分别予以病理学改变的定量评估。结论 本研究采用的前庭测量方法和获得的前庭各个感觉区的测量数据和毛细胞总数及毛细胞密度，为前庭病理学研究的定量分析提供了有益的参考经验和必要的参考数据。

Quantitative observation of vestibular sensory hair cells in experimental animals