大鼠胫前肌深度冻伤模型建立

目的：建立大鼠胫前肌深度冻伤模型了解其病理变化特点，探索组织工程化成肌细胞移植的适宜动物模型。 方法：实验于2003—09／2004—10在四川大学华西医院修复重建实验室完成。选择5月龄SD大鼠30只，随机分10组，正常对照组、术后1，3，5，7，10d，2，4，8，12周组，每组3只，6个样本。采用液氮冷冻后的金属条按一定时间放置于大鼠胫前肌表面，造成胫前肌深度冻伤，测定大鼠胫前肌冻伤前后肌重、磷酸肌酸激酶及同工酶的变化。采用苏木精-伊红染色观察骨骼肌受冻伤后肌组织病理变化；采用免疫组织化学Ⅳ型胶原染色观察受冻肌组织基膜损伤及再生情况；采用Mallory三色染色法观察冻伤组织修复时胶原增生情况，以了解其纤维化愈合的程度。 结果：纳入动物30只，均进入结果分析。①肌重变化：冻伤前，冻伤后1，3，5，7，10d，2，4，8，12周肌重平均值分别为0．5889，0．7066，0．7302，0．6735，0．5929，0．5687，0．5496，0．4099，0．3493，0．3036g。术后1，3，5d组肌重均增高（P〈0．05）；术后7，10d组无显著差异（P〉0．05）；而术后2，4，8，12周组均降低（P〈0．05）。即冻伤后的胫前肌经历最初5d肌肉肿胀，肌重增加，2周开始肌重呈明显下降的过程。②磷酸肌酸激酶及磷酸肌酸激酶-MM含量：术后磷酸肌酸激酶及磷酸肌酸激酶-MM较冻伤前明显下降，术后3d呈逐渐降低趋势。③组织学观察：大鼠胫前肌经深度冻伤后，肌组织变性、坏死，肌纤维的基膜保持较完整，深度冻伤局部缺乏成肌细胞，修复以脂肪性变和纤维增生为主，后期肌肉明显萎缩。 结论：大鼠胫前肌深度冻伤模型适合作为成肌细胞移植的动物模型。

Model establishment of severely cryodamaged tibialis anterior muscles in rats