调节性T细胞外泌体对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的 研究调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)外泌体(exosomes)对牙周膜干细胞(PDLSCs骨分化能力的影响。方法 采用酶消化法分离及培养PDLSCs，通过流式细胞仪分选人外周血中Treg细胞，使用超速离心法提取Treg细胞外泌体，并进行蛋白鉴定，电镜以及粒径分析。在PDLSCs中加入不同浓度的treg外泌体，分别是1×10⁸,1×10¹⁰ particles/ml，并进行共培养。使用Real-time RT-PCR和Western Blot技术来检测7 d和14 d的成骨诱导后PDLSCs中Runx2和Osterix mRNA和蛋白的表达。使用茜素红染色技术进行评估，以了解成骨诱导21 d后钙结节形成的情况。通过Western blot检测treg细胞外泌体作用前后PDLSCs内Hes-1蛋白表达情况。结果 Treg细胞外泌体的形态为直径约139 nm的圆形或椭圆形囊泡。蛋白检测结果显示提取的treg外泌体中高表达CD63、TSG101、CD9和CD81。Treg细胞外泌体促进了PDLSCs的Runx2...