重组人红细胞生成素通过上调核因子-κB p65减少同型半胱氨酸诱导的培养内皮细胞凋亡

目的 探讨红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65的作用.方法 培养人脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)分为正常对照组、Hcy处理组、EPO预处理组和单纯EPO组.四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测NF-κB p65表达.结果 正常对照组、Hcy处理组、EPO预处理组和单纯EPO组(n均=3)细胞凋亡率分别为(2.23±0.4)％、(12.8±1.2)％、(3.2±0.5)％和(2.18±0.6)％(F=1 105.630,P =0.000).Hcy处理组细胞凋亡率较正常对照组显著性增高(P=0.000)；单纯EPO组(P=0.616)与正常对照组无显著性差异；EPO预处理组(P =0.000)和单纯EPO组(P =0.000)均较Hcy处理组显著性降低.蛋白质印迹分析显示,正常对照组基本不表达NF-κB p65.Hcy处理组、单纯EPO组和EPO预处理组(n均=3)分别为66.1±7.3、1 046.1 ±71.3和1 362.4±25.3,三组间存在显著性差异(F=1 310.954,P=0.000).EPO预处理组(P=0.000)和单纯EPO组(P=0.000) NF-κB p65表达均显著性高于Hcy组；EPO预处理组显著性高于单纯EPO组(P=0.007).结论 EPO可能通过上调NF-κB p65表达减少Hcy诱导的内皮细胞凋亡.