| 肿瘤抗原MAGE-3基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 马加海,隋延仿,叶菁,黄亚渝,陈广生,张秀敏. 肿瘤抗原MAGE-3基因的克隆与原核表达[J]. 免疫学杂志, 2004, 20(1): 10-12 |
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| 作者姓名： | 马加海 隋延仿 叶菁 黄亚渝 陈广生 张秀敏 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032;第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032;第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032;第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032;第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032;第四军医大学基础部病理学教研室,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 2 71 4 64)，全军医药卫生科研基金(0 1Z0 84)重点资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 克隆肿瘤抗原MAGE-3基因3’端657bp片段，对其编码的蛋白羧基端97-314aa进行原核表达。方法 从含人MAGE-3基因全长cDNA的pUC19／MAGE-3质粒中经聚合酶链式反应(PCR)扩增3’端657bp片段，并克隆入pGEX-4T-1载体，构建重组原核表达质粒pGEX／MAGE-3，对含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达。结果 从pUC19／MAGE-3重组质粒中扩增获得一条约660bp的条带，测序结果表明与GenBank公布的MAGE-3序列一致，成功地构建了pGEX／MAGE-3原核表达质粒，含有该质粒的大肠杆菌DH5α经异丙基-β-半乳糖苷(Isopropyl—beta—D—thiogalactopyranoside，IPTG)诱导后表达Mr为54000的谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferse，GST)融合蛋白。表达的融合蛋白约占菌体蛋白总量的28％。结论 成功地构建了pGEX／MAGE-3原核表达质粒，获得了MAGE-3蛋白羧基端97～314aa融合蛋白，为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 基因/MEGE-3 原核表达 聚合酶链式反应 |
| 文章编号： | 1000-8861(2004)01-0010-03 |
| 修稿时间： | 2003-04-14 |
Cloning and prokaryotic expression of tumor antigen MAGE-3 |
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| MA Jia hai,SUI Yan fang,YE Jing,HUANG Ya yu,CHEN Guang sheng,ZHANG Xiu min. Cloning and prokaryotic expression of tumor antigen MAGE-3[J]. Immunological Journal, 2004, 20(1): 10-12 |
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| Authors: | MA Jia hai SUI Yan fang YE Jing HUANG Ya yu CHEN Guang sheng ZHANG Xiu min |
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| Keywords: | Gene/MAGE-3 Prokaryotic expression PCR |
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