| 幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表纯化及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 鞠小丽,邵世和,郝渭滨,董苏荣,崔蕾蕾.幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表纯化及初步鉴定[J].现代预防医学,2008,35(10). |
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| 作者姓名： | 鞠小丽 邵世和 郝渭滨 董苏荣 崔蕾蕾 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅科技计划
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江苏大学高级人才项目 |
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| 摘 要： | 目的]构建幽门螺杆菌(H. pylori) NCTC11637菌株36kDa (OMP36)外膜蛋白基因原核表达系统,探索研制H. pylori疫苗的新途径.方法]培养和收集H. pylori NCTC11637菌株,提取基因组DNA, PCR扩增目的基因片断.将其克隆到T载体并测序,再将目的基因克隆入PET32a( ),构建重组表达载体PET32a-OMP36.转化E.coliBL21后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白.(结果)测序分析表明,插入的基因片断为987bp,表达的蛋白的相对分子质量(Mr)约为36kDa,并显示具有良好的抗原性.SDS-PAGE检测表明,表达量占细菌总蛋白的37%,镍亲和层析纯化率约92%.Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性.结论]成功克隆了外膜蛋白OMP 36kDa的编码基因,其表达产物OMP 36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H. pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 外膜蛋白 基因表达 蛋白纯化 幽门螺杆菌 外膜蛋白 蛋白重组 纯化 EXPRESSION HELICOBACTER PYLORI OUTER MEMBRANE PROTEIN IDENTIFICATION 开发 试剂盒 相对分子质量 编码基因 抗原活性 总蛋白 细菌 表达量 抗原性 显示 分析表 结果 |
EXPRESSION, PURIFICATION AND PRELIMINARY IDENTIFICATION OF 36KDA OUTER MEMBRANE PROTEIN FROM HELICOBACTER PYLORI |
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