| 用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究 |
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| 引用本文： | 马卫列,刘芳,何承伟.用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究[J].第三军医大学学报,2006,28(14):1476-1478. |
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| 作者姓名： | 马卫列 刘芳 何承伟 |
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| 作者单位： | 广东医学院生物化学教研室,湛江,524023;广东医学院生物化学教研室,湛江,524023;广东医学院生物化学教研室,湛江,524023 |
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| 基金项目： | 广东省卫生厅青年科学基金，广东省湛江市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的探索用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin)重组蛋白的最佳生产工艺路线.方法用pThioHis-endo重组质粒转化不同的大肠杆菌BL21、JM109、DH5α,经几种不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(isopropylthio-galactoside,IPTG)诱导表达重组融合蛋白,或诱导表达不同时间后,采用SDS-PAGE分析表达产物;按所优化的条件进行重组内皮抑素的表达、包涵体的提取、洗涤、变性和复性,最后经Ni 柱纯化,再通过SDS-PAGE分析纯化的结果.结果3种大肠杆菌表达效果相差无几,最佳IPTG的浓度0.9 mmol/L,最佳诱导时间为5 h,经Ni 柱纯化后可获得可溶性的重组内皮抑素.结论利用本实验的优化条件可获得高产量、高纯度、可溶性的小鼠内皮抑素重组蛋白.
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| 关 键 词： | endostatin 硫氧还蛋白融合表达系统 融合蛋白 |
| 文章编号： | 1000-5404（2006）14-1476-03 |
| 收稿时间： | 2005-04-02 |
| 修稿时间： | 2006-01-10 |
To express mouse endostatin by thioredoxin fusion expression system |
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| MA Wei-lie,LIU Fang,HE Cheng-wei.To express mouse endostatin by thioredoxin fusion expression system[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2006,28(14):1476-1478. |
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| Authors: | MA Wei-lie LIU Fang HE Cheng-wei |
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| Institution: | Department of Biochemistry, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | endostatin |
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