| 携带增强型绿色荧光蛋白基因的shRNA真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 姜晓兵,赵洪洋,周凤.携带增强型绿色荧光蛋白基因的shRNA真核表达载体的构建[J].中国病理生理杂志,2005,21(10):2078-2080. |
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| 作者姓名： | 姜晓兵 赵洪洋 周凤 |
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| 作者单位： | 1华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科， 湖北 武汉 430022；2深圳市眼科医院， 广东 深圳 580000 |
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| 摘 要： | 目的：构建携带EGFP的shRNA真核表达载体。 方法: 应用PCR的方法从pBSK/U6质粒上扩增出U6启动子及其下游的Xbal、SalI和BamHI酶切位点，并增加NotI位点。将扩增的产物连入pEGFP-C1载体MluI位点处，构建成携带EGFP的siRNA真核表达载体。应用该载体介导针对EGFP的短发夹环RNA（pEGFP/U6/EGFP），转染U251细胞，通过荧光显微镜和流式细胞仪检测EGFP的表达，验证所构建载体在细胞内产生RNA干扰的效果。 结果: 与对照组比较pEGFP/U6/EGFP在细胞内对EGFP的抑制效果达89.8%。 结论: 成功构建携带EGFP的shRNA真核表达载体。
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 基因 U521细胞 |
| 文章编号： | 1000-4718（2005）10-2078-03 |
| 收稿时间： | 2004-01-12 |
| 修稿时间： | 2004-01-122004-03-21 |
Construction of shRNA expression vector carrying enhanced green fluorescent protein gene |
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| JIANG Xiao-bing,ZHAO Hong-yang,ZHOU Feng.Construction of shRNA expression vector carrying enhanced green fluorescent protein gene[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2005,21(10):2078-2080. |
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| Authors: | JIANG Xiao-bing ZHAO Hong-yang ZHOU Feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Green fluorescent protein Genes U521 cells |
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