| 血管内皮细胞生长因子基因体外转染小鼠NIH3T3细胞的生物活性 |
| |
| 引用本文： | 郑岩,易成刚,丁坦,郭树忠,胡学煜,周志强,潘华,刘丹. 血管内皮细胞生长因子基因体外转染小鼠NIH3T3细胞的生物活性[J]. 中国临床康复, 2006, 10(33): 65-67 |
| |
| 作者姓名： | 郑岩 易成刚 丁坦 郭树忠 胡学煜 周志强 潘华 刘丹 |
| |
| 作者单位： | [1]解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所,陕西省西安市710032 [2]解放军第四军医大学西京医院骨科,陕西省西安市710032 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目青年科学基金资助项目（30400471） |
| |
| 摘 要： | 目的：用基因工程方法改造成纤维细胞，使其分泌血管内皮细胞生长因子，观察成纤维细胞作为基因转染的靶细胞的可行性。方法：实验于2005-11在解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒的扩增、提取、纯化和鉴定后，将培养14d细胞融合约80％的小鼠NIH3T3细胞在24孔板中进行转染，细胞随机分为3组，每组10孔，分别为PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组．空质粒转染组和不转染质粒组。采用免疫组织化学化学检测血管内皮细胞生长因子表达。ELISA方法检测血管内皮细胞生长因子外分泌。四甲基偶氮唑盐法检测小鼠NIH3T3细胞对PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染的敏感性。结果：①PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒的基因测序结果显示序列正确。②免疫组织化学染色显示：小鼠NIH3T3细胞转染4d后胞浆内可观察到阳性表达产物，对照组呈阴性结果。③ELISA检测结果：小鼠NIH3T3细胞转染14d后，PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组3组培养上清中血管内皮细胞生长因子浓度分别346&;#177;23，0，0ng／L（P〈0．05）。④四甲基偶氮唑盐法检测结果：PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组所测的490nm的A值比较差异均无显著性（依次为0．96&;#177;0.11，0．91&;#177;0．10，0．98&;#177;0．16，P〉0．05）。PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染对小鼠NIH3T3细胞增殖无影响。结论：小鼠NIH3T3细胞可作为血管内皮细胞生长因子基因转染的靶细胞，用于基因治疗。
|
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子类 基因疗法 新生血管化 生理性 |
| 文章编号： | 1671-5926（2006）33-0065-03 |
| 收稿时间： | 2006-06-24 |
| 修稿时间： | 2006-07-10 |
Biological activity of mouse NIH3T3 cells following in vitro transfection of vascular endothelial cell growth factor gene |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
