| 靶向SMAD3基因的shRNA重组慢病毒对大鼠肝再生的作用 |
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| 引用本文： | 张莹,孔贺利,郑素军,刘梅,陈煜,刘霜,段钟平.靶向SMAD3基因的shRNA重组慢病毒对大鼠肝再生的作用[J].世界华人消化杂志,2012(35):3431-3438. |
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| 作者姓名： | 张莹 孔贺利 郑素军 刘梅 陈煜 刘霜 段钟平 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军第302医院;首都医科大学附属北京佑安医院 |
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| 基金项目： | 国家125科技重大专项“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”基金资助项目,No.2012ZX10002004-006;No.2012ZX10004904-003-001;国家自然科学基金资助项目,No.30800979;北京自然科学基金资助项目,No.7102085;北京市科技新星基金资助项目,No.2007B055;北京市卫生系统高层次卫生技术人才基金资助项目,No.2011-3-083~~ |
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| 摘 要： | 目的:应用大鼠肝大部切除肝再生模型,将前期构建好的靶向SMAD3基因的shRNA重组慢病毒注射入大鼠体内,观察SMAD3 shRNA对大鼠肝再生的影响.方法:将60只♂Wistar大鼠随机分为3组:SMAD3 shRNA组(20只)、shRNA对照组(20只)、生理盐水对照组(20只),通过脾脏注射方法给药,慢病毒给药剂量为1.0×108TU/只,生理盐水对照组给予等体积500L生理盐水.给药96h后行2/3肝大部切除,构建大鼠肝再生模型;肝大部切除术后96h各组分别除死大鼠7只,剩余大鼠于144h处死,收集肝脏标本,Real-Time PCR、免疫组织化学检测肝组织SMAD3表达,免疫组织化学检测肝组织Ki67表达,测定大鼠肝质量/体质量,观察SMAD3 shRNA对肝再生的影响.结果:Real-Time PCR检测显示,通过脾脏注射慢病毒,在96、144h处死时间点,SMAD3 shRNA组SMAD3 mRNA分别较shRNA对照组平均下降73%、63%.免疫组织化学检测显示SMAD3蛋白表达明显下降.Ki67免疫组织化学结果显示,肝大部切除术后96、144h,SMAD3 shRNA组Ki67表达阳性细胞数均明显多于生理盐水对照组及shRNA对照组,表明抑制SMAD3表达后肝细胞增殖活跃.大鼠肝质量与体质量比值显示,SMAD3 shRNA组分别较生理盐水对照组及shRNA对照组有增加趋势(96h:4.50±0.43vs3.97±0.55vs3.98±0.40,144h:4.66±0.54vs4.15±0.51vs4.20±0.34),但没有统计学意义(P>0.05).结论:SMAD3 shRNA在大鼠体内可一定程度上促进肝细胞增殖,但对肝再生的促进作用尚弱.
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| 关 键 词： | SMAD3 shRNA 慢病毒 肝再生 |
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