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10-23型脱氧核酶对mRNA表达的双重抑制作用
引用本文:王全会,左刚,施水兰,赵增强,崔玉芳,毛建平. 10-23型脱氧核酶对mRNA表达的双重抑制作用[J]. 军事医学科学院院刊, 2005, 29(6): 531-534,579
作者姓名:王全会  左刚  施水兰  赵增强  崔玉芳  毛建平
作者单位:1. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,100850
2. 解放军476医院免疫学研究室,福州,350002
基金项目:国家自然科学基金(30271546)及北京市自然科学基金(5033020)资助项目.
摘    要:目的:10-23型脱氧核酶是脱氧核糖核酸酶中的一种,能主动在RNA分子嘌呤.嘧啶结合点切割所有RNA分子,通过比较反义寡核苷酸的作用,初步研究10-23型脱氧核酶对基因表达抑制作用的发生机制。方法:采用体外转录GFPmRNA与脱氧核酶反应,以及GFP表达质粒与脱氧核酶共转染HeLa细胞,观察脱氧核酶对GFP的抑制作用。结果:体外和胞内实验均显示据靶点设计的10-23型脱氧核酶对绿色荧光蛋白mRNA具有切割作用。当10—23型脱氧核酶的两翼结合臂各具有连续8碱基互补而处在两翼结合臂和酶解核心连接处的2碱基错配时,尽管不能切割mRNA但是在胞内仍然有表达抑制作用;而当两翼结合臂具有4互补碱基紧接1错配碱基和4互补碱基时,10—23型脱氧核酶体外和胞内均丧失作用。结论:10-23型脱氧核酶对基因较强的表达抑制作用来自结合臂的反义寡核苷酸依赖的RNaseH降解,和本身对mRNA直接切割作用的叠加,即10—23型脱氧核酶在细胞内具有对基因识别切割和诱导RNaseH进行再切割的双重作用。

关 键 词:mRNA 10—23型脱氧核酶 反义寡核苷酸 基因表达
文章编号:1000-5501(2005)06-0531-05
收稿时间:2005-04-20
修稿时间:2005-04-20

10-23 DNA enzyme has twofold cleaving effects on target mRNA
WANG Quan-Hui,ZUO Gang,SHI Shui-Lan,ZHAO Zeng-Qiang,CUI Yu-Fang,MAO Jian-Ping. 10-23 DNA enzyme has twofold cleaving effects on target mRNA[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2005, 29(6): 531-534,579
Authors:WANG Quan-Hui  ZUO Gang  SHI Shui-Lan  ZHAO Zeng-Qiang  CUI Yu-Fang  MAO Jian-Ping
Affiliation:1. Department of Immunology, Institute of Radiation Medicine, Beijing 100550, China; 2. Department of Immunology, The 476th Hospital, PLA, Fuzhou 350002, China
Abstract:
Keywords:mRNA   10-23 DNA enzyme   oligonucleotides, antisense    gene expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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