| 广地龙特异性PCR分子鉴定 |
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| 引用本文： | 陈维明,马梅,龚玲,李薇. 广地龙特异性PCR分子鉴定[J]. 广州中医药大学学报, 2015, 0(3): 499-503,507 |
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| 作者姓名： | 陈维明 马梅 龚玲 李薇 |
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| 作者单位： | 广州中医药大学中药学院,广东广州,510006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(编号:81374035) |
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| 摘 要： | 【目的】筛选出对广地龙具有特异性鉴别意义的PCR引物，建立一种快速、准确鉴别广地龙基原真实性的方法。【方法】收集药典收载的4种地龙原动物以及市场常见地龙混淆品6种，从GenBank数据库中下载有关蚯蚓的12SrRNA基因序列，采用通用引物对10种样本PCR扩增后进行测序，依其序列间差异设计3对非保守区特异性引物，筛选对广地龙具有特异性扩增的引物。【结果】引物12St/12Sf对广地龙产生特异性扩增，当退火温度提升至64℃时，其反应表现出高度特异性，仅广地龙具有良好的单一扩增带，而其他样品在同样的条件下无扩增带。所得特异性引物在15种市售广地龙药材中验证结果良好，与传统形态学鉴定结果基本一致。【结论】引物12St/12Sf可作为广地龙物种鉴定的特异性标记物，可以实现广地龙近缘多个物种快速而又准确的鉴定，且不受实验材料的完整性、加工干燥等因素的影响。
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| 关 键 词： | 广地龙 基原鉴定 PCR技术 12SrRNA |
Specific Polymerase Chain Reaction Molecular Identification of Pheretima aspergillum (E. Perrier) |
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| CHEN Weiming , MA Mei , GONG Ling , LI Wei. Specific Polymerase Chain Reaction Molecular Identification of Pheretima aspergillum (E. Perrier)[J]. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, 2015, 0(3): 499-503,507 |
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| Authors: | CHEN Weiming MA Mei GONG Ling LI Wei |
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| Affiliation: | CHEN Weiming;MA Mei;GONG Ling;LI Wei;College of Chinese Herbal Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pheretima aspergillum (E. Perrier) Origin identification Polymerase chain reaction technology 12SrRNA |
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