| 小鼠FcγRⅢ原核表达、纯化及鉴定 |
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| 作者姓名： | 张利娜 张改平 席俊 苗现伟 王丽 乔松林 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002
2. 河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目，国家重点基础研究发展计划(973)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的: 制备纯化重组蛋白mFcγRⅢ,并鉴定其生物学活性.方法: 从克隆载体mRⅢ-T中扩增mFcγRⅢ胞外区,构建原核表达载体pETmRⅢ,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot对重组表达蛋白进行鉴定;表达产物通过包涵体纯化后用稀释方法复性;ELISA检测复性蛋白活性.结果: 成功构建了重组表达质粒pETmRⅢ,纯化和复性了重组蛋白mFcγRⅢ;复性的重组蛋白mFcγRⅢ具有较强的体外活性.结论: 原核重组蛋白mFcγRⅢ复性后具有较强的体外结合配体特性,为探索重组蛋白治疗自身免疫病奠定了基础.
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| 关 键 词： | FcγRⅢ重组蛋白 原核表达 包涵体 复性 |
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