miR-214靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路对糖尿病肾病大鼠的保护机制

目的 探讨微小RNA（miR-214）靶向磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠的氧化应激和肾间质纤维化的作用和机制。方法 将40只SD雄性大鼠分为对照组（control组）、模型组（DN组）、miR-214阴性对照组（DN+miR-NC组）和miR-214模拟物组（DN+miR-214 mimics组），每组10只；qRT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-214的表达；电子天平称量各组大鼠体质量和肾质量，计算肾指数；血糖仪测定各组大鼠的空腹血糖（FPG）；双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白（UP）水平；全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐（Scr）和血清尿素氮（BUN）的水平；HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化；Masson染色观察各组大鼠肾组织间质纤维化；ELISA检测各组大鼠血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的表达；免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达；生物信息学工具预测靶基因；双荧光素酶报告基因检测基因或蛋白之间的相互作用；Western blot检测各组大鼠肾组织中PTEN、p-PI3K、p-AKT和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的表达。结果 miR-214在DN大鼠肾组织中呈低表达，在DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中表达显著上调（均P＜0.001）；miR-214 mimics使大鼠的体质量升高，肾指数、FPG、UP、Scr及BUN水平下调（均P＜0.05）；DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中肾间质中的炎性细胞浸润减少，胶原纤维沉积减少（P＜0.01）；miR-214 mimics使大鼠血清中MDA的水平降低，SOD、GSH、GSH-PX的水平升高（均P＜0.05），大鼠肾组织中TGF-β1的表达水平下降（P＜0.05）；miR-214与PTEN存在靶向关系；miR 214 mimics使大鼠肾组织中PTEN蛋白表达下调，p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达上调（均P＜0.05）。结论 miR-214在DN大鼠肾组织中低表达，过表达miR-214对DN大鼠的肾组织有保护作用，可能与降低肾组织的氧化应激水平、TGF-β1蛋白表达和抑制PI3K/AKT通路激活有关。

Protective mechanism of miR-214 targeting PTEN mediated PI3K/Akt signaling pathway in diabetic nephropathy rats