| 婴幼儿轮状病毒VP7基因cDNA文库构建 |
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| 引用本文： | 吴景华,王海欣,董爱英.婴幼儿轮状病毒VP7基因cDNA文库构建[J].现代预防医学,2009,36(15). |
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| 作者姓名： | 吴景华 王海欣 董爱英 |
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| 作者单位： | 华北煤炭医学院附属医院检验科,唐山,063000 |
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| 摘 要： | 目的]分离与培养婴幼儿轮状病毒,并克隆婴幼儿轮状病毒外壳蛋白VP7基因,导入pMD18-T载体,成功构建VP7基因cDNA文库,为构建轮状病毒基因工程疫苗奠定基础. 方法]提取婴幼儿轮状病毒总RNA,通过RT-PCR扩增,获得目的基因片段VP7,进行分离纯化与回收,最后纯化的VP7基因与pMD18-T载体进行连接,进行质粒抽提与鉴定. 结果]提取的婴幼儿轮状病毒总RNA比较完整,28S、18S,5S条带清晰可见,成功扩增VP7基固,连接pMD18-T载体,转化感受态菌(DH5α),通过蓝白斑筛选得到DNA阳性重组子(载体+VP7基因片段).结论]通过对婴幼儿轮状病毒培养、VP7基因扩增、基因片段回收、连接、转化、鉴定等一系列技术,初步确定婴幼儿轮状病毒外过壳蛋白VP7基因已导入pMD18-T载体,成功构建VP7基因cDNA文库,为进一步研制轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础.
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| 关 键 词： | 婴幼儿轮状病毒 pMD18-T载体 基因文库 |
CONSTRUCTION OF GENE LIBRARY CONTAINING GROUP A ROTA VIRUS VP7 GENE |
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| WU Jing-hua,WANG Hai-rong,DONG Ai-ying.CONSTRUCTION OF GENE LIBRARY CONTAINING GROUP A ROTA VIRUS VP7 GENE[J].Modern Preventive Medicine,2009,36(15). |
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| Authors: | WU Jing-hua WANG Hai-rong DONG Ai-ying |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VP7 PCR RT-PCR |
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