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直标法流式细胞术测定人红细胞表面CD35水平的方法学研究
引用本文:胡金川,田亚平,江朝光,谷峰,高艳红. 直标法流式细胞术测定人红细胞表面CD35水平的方法学研究[J]. 标记免疫分析与临床, 2008, 15(6)
作者姓名:胡金川  田亚平  江朝光  谷峰  高艳红
作者单位:解放军总医院生化科,北京,100853;解放军总医院医务部,北京,100853
基金项目:军队计划专项课题  
摘    要:为研究直标法流式细胞术测定红细胞表面CD35免疫分子水平的方法,抽取健康献血员静脉血,采用直标法流式细胞术测定红细胞CD35水平,研究测试后数据分析方法的可靠性和测试前抗凝剂、标本放置时间和抗体用量等因素对测定结果的影响.结果显示:M1界值选择对CD35阳性红细胞(CD35+-E)百分率计算结果有很大影响,CD35几何平均荧光强度(CD35-GMFI)随FL2通道电压升高而增加,而CD35相对几何平均荧光强度(CD35-rGMFI)不受电压影响;EDTA-2K、肝素锂、枸橼酸钠三种抗凝剂以及标本放置72h内CD35+-E百分率和CD35-rGMFI结果均无明显差异(P>0.05);取5×105个人红细胞反应时,最适合的鼠抗人CD35单克隆抗体量为7μL.可见,CD35-rGMFI是描述红细胞表面CD35水平的最理想指标,抗凝剂、标本放置时间对测定结果无明显影响,当红细胞数量为5×105时,最佳抗体用量为7μL.

关 键 词:流式细胞术  荧光抗体技术  直接  红细胞免疫  CD35抗原  方法学

Detection of Human Erythrocytes CD35 by Flow Cytometry with Direct Fluorescent Antibody Technique
HU Jin-chuan,TIAN Ya-ping,JIANG Chao-guang,GU Feng,GAO Yan-hong. Detection of Human Erythrocytes CD35 by Flow Cytometry with Direct Fluorescent Antibody Technique[J]. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine, 2008, 15(6)
Authors:HU Jin-chuan  TIAN Ya-ping  JIANG Chao-guang  GU Feng  GAO Yan-hong
Abstract:
Keywords:
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