| RSD-7的克隆及其在睾丸组织中的定位 |
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| 作者姓名： | Zhang XD Gou DW Miao SY Zhang JC Zong SD Wang LF |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005
2. National Family Planning Research Institute, Beijing |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30240019),国家重点基础研究发展规划项目基金(G1999055901),国家高技术研究发展计划项目(863项目)(2001AA221131)资助~~ |
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| 摘 要： | 目的 分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法 采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northern blot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果 (1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长l238bp,编码232个氨基酸,GenBank接收号为AF315467。序列分析显示,RSD-7基因编码蛋白质含有1个Ubiquitin-like结构域。(2)Northern blot结果显示,在8种成鼠组织中,RSD-7基因仅在睾丸组织中有明显表达。不同发育天龄的大鼠睾丸组织Northern blot结果显示,出生后30d的大鼠RSD-7基因开始表达,一直到120d仍有表达。(3)RSD-7 cDNA在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了GST-RSD-7融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗RSD-7蛋白的多克隆抗体。(4)通过免疫组织化学方法,RSD-7蛋白定位于Sertoli细胞胞浆和质膜上。结论 初步分析了RSD-7基因的表达特征并制备了抗RSD-7多克隆抗体,为进一步研究RSD-7蛋白在精子发生过程中的功能提供了条件。
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| 关 键 词： | 精子发生 基因克隆 RSD－7cDNA Sertoli细胞 |
Cloning and characterization of a novel rat gene RSD-7 differentially expressed in testis |
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| Zhang XD,Gou DW,Miao SY,Zhang JC,Zong SD,Wang LF.Cloning and characterization of a novel rat gene RSD-7 differentially expressed in testis[J].Acta Academiae Medicinae Sinicae,2003,25(3):289-293,T002. |
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| Authors: | Zhang Xiao-dong Gou Da-wei Miao Shi-ying Zhang Jian-chao Zong Shu-dong Wang Lin-fang |
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| Institution: | State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, CAMS, PUMC, Beijing 100005, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | spermatogenesis gene cloning RSD-7cDNA Sertoli cell |
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