α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达 |
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引用本文: | 林蓓,郝莹莹,王冬冬,朱连成,张淑兰,齐藤真木子,岩森正男.α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达[J].中国医学科学院学报,2008,30(3). |
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作者姓名: | 林蓓 郝莹莹 王冬冬 朱连成 张淑兰 齐藤真木子 岩森正男 |
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作者单位: | [1]中国医科大学附属盛京医院妇产科,沈阳110004 [2]日本东京大学医学部小儿科,日本东京113-8655 [3]日本近畿大学理工学部化学科,日本大阪577-8502 |
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摘 要: | 目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H。通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化。结果基因转染后细胞RMG-Ⅰ-H中H-1抗原及Lewisy抗原显著增加,特别是Lewisy抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化。结论α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewisy抗原的表达;RMG-Ⅰ Lewisy高表达细胞系的建立为研究Lewisy抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。
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关 键 词: | 卵巢肿瘤 α1 2-岩藻糖基转移酶 基因 转染 Lewis抗原 |
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