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重组溶葡萄球菌酶成品中主药蛋白质含量的测定
引用本文:莫云杰,李国栋,陆海荣,孙睿华,黄青山. 重组溶葡萄球菌酶成品中主药蛋白质含量的测定[J]. 中国生化药物杂志, 2006, 27(3): 163-165
作者姓名:莫云杰  李国栋  陆海荣  孙睿华  黄青山
作者单位:1. 上海高科联合生物技术研发有限公司,上海,201206
2. 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433
摘    要:目的建立一种反相高效液相色谱法测定重组溶葡萄球菌酶成品中主药蛋白质的含量。方法VydacC18柱(250 mm×4.6 mm,300,5μm),流动相A为0.1%三氟乙酸溶液,流动相B为三氟乙酸-乙腈(1∶999)进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,进样量为20μL,检测波长为280 nm。结果重组溶葡萄球菌酶在5~30μg范围内和峰面积之间具有很好的线性关系,相关系数为0.999 8,多次测定的RSD<10%,平均回收率为103.7%,RSD为1.46%。结论此方法可以用于重组溶葡萄球菌酶的含量测定。

关 键 词:重组溶葡萄球菌酶  反相高效液相色谱法  含量测定
文章编号:1005-1678(2006)03-0163-03
收稿时间:2005-08-16
修稿时间:2006-01-12

Determination of recombinant lysostaphin content in its final product
MO Yun-jie,LI Guo-dong,LU Hai-rong,SUN Rui-hua,HUANG Qing-shan. Determination of recombinant lysostaphin content in its final product[J]. Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics, 2006, 27(3): 163-165
Authors:MO Yun-jie  LI Guo-dong  LU Hai-rong  SUN Rui-hua  HUANG Qing-shan
Abstract:Purpose To establish a RP-HPLC method for determination of recombinant lysostaphin content in its final product.MethodsThe RP-HPLC method was performed on a Vydac C_(18) column(250 mm×4.6 mm,300 ,5 μm).The mobile phase A was composed of trifluoroacetic acid-water(1∶999) and B was composed of trifluoroacetic acid-acetonitrile(1∶999).The flow rate was 1.0 mL/min,and the detection wave length was 280 nm.ResultsThe linear range was 5-30 μg,r=0.999 8.The average recovery was 103.7%,and RSD=1.46%(n=9).ConclusionThe method was simple,accurate and suitable for determination of recombinant lysostaphin content.
Keywords:recombinant lysostaphin  RP-HPLC  content determination
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