| 摘 要： | 目的构建新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)和甲型流感病毒双价DNA疫苗, 并在小鼠模型中评价其免疫原性。方法将SARS-CoV-2 Beta突变株S1蛋白编码序列和甲型流感病毒Cambodia (H3N2)株HA蛋白编码序列进行密码子优化合成, 采用Over-lapping PCR方法, 将两个编码基因通过自裂解2A肽(self-cleaving 2A peptides)序列连接成S1-2A-HA片段, 构建能同时表达S1蛋白和HA蛋白的双价DNA疫苗, 命名为pVRC-S1-2A-HA, 间接免疫荧光和Western blot验证S1蛋白和HA蛋白的表达。将DNA疫苗以肌肉注射加电转途径(IM+EP)免疫BALB/c小鼠, 间接ELISA、假病毒中和试验和血凝抑制试验检测小鼠体液免疫应答, IFN-γ ELISPOT、胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining, ICS)和CBA法检测小鼠细胞免疫应答。结果双价DNA疫苗pVRC-S1-2A-HA可...
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