| sH-2Kd肽复合物的构建及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 杨新星,郝友华,张正茂,宋娜,杨东亮. sH-2Kd肽复合物的构建及多克隆抗体的制备[J]. 免疫学杂志, 2007, 23(4): 436-439 |
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| 作者姓名： | 杨新星 郝友华 张正茂 宋娜 杨东亮 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的 构建可溶性的H-2Kd肽复合物,并制备抗MHC-I(H-2Kd)分子多克隆抗体.方法 原核高效表达的sH-2Kd-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc131-139)的存在下,体外复性折叠成可溶性的H-2Kd-β2m-抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体.应用纯化的该复合物单体免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体.结果 ①Western blot检测显示获得了生物素化的sH-2Kd-HBe复合物单体.②Western blot检测显示抗MHC-I(H2Kd)分子多克隆抗体与复合物单体有很好的抗原抗体反应;Balb/C小鼠脾脏冰冻切片的免疫组化结果:在细胞膜表面见棕色着色.③Dot-ELISA检测该多克隆抗体的滴度可以达到1:3 200.结论 成功构建了具有完整构象的生物素化sH-2Kd-HBc复合物单体,制备了抗MHC-I(H-2Kd)分子多克隆抗体.
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| 关 键 词： | sH-2Kd-β2m-抗原肽复合物 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）04-0436-04 |
| 修稿时间： | 2006-08-312006-12-05 |
Construction of soluble H-2Kd-peptide complex and preparation of polyclonal antibody |
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| YANG Xin-xing,HAO You-hua,ZHANG Zheng-mao,SONG Na,YANG Dong-liang. Construction of soluble H-2Kd-peptide complex and preparation of polyclonal antibody[J]. Immunological Journal, 2007, 23(4): 436-439 |
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| Authors: | YANG Xin-xing HAO You-hua ZHANG Zheng-mao SONG Na YANG Dong-liang |
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| Affiliation: | Division of Clinical Immunology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China |
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