| 应用生物发光技术定量检测PCR扩增产物 |
| |
| 引用本文： | 姚群峰,宁勇,徐顺清,周宜开.应用生物发光技术定量检测PCR扩增产物[J].临床输血与检验,2003,5(3):179-182. |
| |
| 作者姓名： | 姚群峰 宁勇 徐顺清 周宜开 |
| |
| 作者单位： | 1. 430064,武汉,湖北药检高等专科学校
2. 华中科技大学同济医学院 |
| |
| 摘 要： | 目的 建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法 ,并用于HBV定量PCR检测。方法 首先利用ATP硫酰化酶 (ATPsulfurylase)将焦磷酸 (PPi)定量转化成ATP ,然后利用虫荧光素酶 (luciferase)系统发光检测ATP ,从而确定样品中PPi含量。利用 2次PCR法扩增HBVDNA目的片段 ,并进行回收纯化定量 ,以之作为阳性标准模板制作标准曲线。选择适当的循环次数扩增样品中HBVDNA ,利用化学发光法检测扩增产物中PPi的量 ,进而确定样品中HBVDNA模板的量。结果 当起始模板量为 (10～ 5 )× 10 5拷贝 ,循环次数为 2 5 ,发光值与起始模板浓度呈现良好的相关。检测 32份样品血清 ,其中 2 3例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 1 6× 10 5拷贝 / μl,9例HBsAg(+)、HBeAg(- )、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 5 6× 10 3 拷贝 / μl。结论 本方法是一种操作简便、灵敏度高的定量PCR方法
|
| 关 键 词： | 应用 生物发光技术 定量检测 PCR扩增产物 聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1671-2587(2003)03-0179-04 |
| 修稿时间： | 2002年12月8日 |
Determination of PCR product by bioluminescence |
| |
| YAO Qunfeng,NING Yong,XU Shunqing,et al..Determination of PCR product by bioluminescence[J].Journal of Clinical Transfusion and Laboratory Medicine,2003,5(3):179-182. |
| |
| Authors: | YAO Qunfeng NING Yong XU Shunqing |
| |
| Institution: | YAO Qunfeng,NING Yong,XU Shunqing,et al.Hubei Pharmacy and Clinical Chemistry College,Wuhan 430064 |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Bioluminescence Polymerase chain reaction |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
