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实时荧光定量PCR方法检测乙型肝炎病毒基因型
引用本文:孙余婕,沈佐君.实时荧光定量PCR方法检测乙型肝炎病毒基因型[J].分子诊断与治疗杂志,2009,1(3):148-151.
作者姓名:孙余婕  沈佐君
作者单位:安徽医科大学附属省立医院,安徽省立医院,安徽省临床检验中心,安徽,合肥230001
基金项目:安徽省自然科学基金,安徽省人才开发基金
摘    要:目的建立一种快速准确的实时荧光PCR方法检测乙型肝炎病毒基因型。用此方法对安徽地区乙肝患者进行检测,了解该地区HBV基因型分布情况。方法首先用实时荧光定量PCR方法对150例安徽地区乙肝患者进行HBVDNA定量检测和分型检测,然后对其中载毒量大于5000IU/mL的113例标本和1例1000IU/mL≤载毒量<5000IU/mL进行测序分型检测,验证所建立方法的准确性,了解安徽地区HBV基因型分布情况。结果150例HBV样本中HBVDNA含量<1000IU/mL30例,分型检测结果均为阴性,对载毒量≥5000IU/mL的样本检出率为97.35%(110/113);对1000IU/mL≤载毒量<5000IU/mL的样本检出率为14.29%(1/7);对全部DNA阳性样本的检出率为92.5%(111/120)。HBV分型检测与HBVDNA测序检测的114例样本中,只要是HBVB基因型、C基因型或B/C混合型,乙型肝炎病毒基因分型检测都能检出来(共111例),其中部分样本经分型检测属于B/C混合基因型,测序结果都是混合基因型中占优势的基因型结果,总体符合率为100%。未能被本法检出的样本共3例,3例样本经测序分型均为D型。120例病毒载毒量≥1000IU/mL乙肝患者中B型病例占51.67%(62/120);C型占29.17%(35/120);B/C混合型占11.67%(14/120)。PCR测序检出为D型3例,占2.5%(3/120)。结论应用TaqMan探针的实时荧光定量PCR方法能快速对我国HBV主要基因型B基因型、C基因型进行检测,结果准确可靠,特异性高。安徽地区的HBV基因型以B型为主,C型次之,亦存在着D型的少数感染病例和B/C的混合感染。

关 键 词:乙型肝炎病毒  聚合酶链反应  基因型

A real-time PCR method for determination of hepatitis B virus genotype
SUN Yujie,SHEN Zuojun.A real-time PCR method for determination of hepatitis B virus genotype[J].Journal of Molecular Diagnosis and Therapy,2009,1(3):148-151.
Authors:SUN Yujie  SHEN Zuojun
Institution:(Anhui Provincial Center for Clinical Laboratory,Anhui Provincial Hospital,Anhui Medical University,Anhui,Hefei 230001,China)
Abstract:
Keywords:
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