摘 要: | 目的评估rpoB基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应-冷单链构象多态性(PCR-冷SSCP)方法对87株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的22份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果PCR扩增rpoB基因的敏感性为100pgDNA及5000个菌体,属于分支杆菌特异。所有分离菌的rpoB基因PCR扩增均为阳性。采用套式PCR可使扩增敏感性提高100倍。与传统药敏试验方法相比,PCR-冷SSCP对87株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为89.6%及100%。22份涂阳培阳痰标本中套式PCR扩增阳性的6份均为高度利福平耐药,其SSCP结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论PCR-冷SSCP检测结核分支杆菌rpoB基因突变快速、简便、易行,适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性,该技术可望用于临床标本直接检测
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