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反义RNA抑制乙肝病毒复制的临床分子生物学研究
引用本文:吴赤红,曾争,王勤环,于敏.反义RNA抑制乙肝病毒复制的临床分子生物学研究[J].中国急救医学,2001,21(5):263-265.
作者姓名:吴赤红  曾争  王勤环  于敏
作者单位:北京大学第一医院感染疾病科,
基金项目:国家自然科学基金资助(No39700125)
摘    要:目的 研究表达反义RNA的逆转录病毒载体体外转基因抗乙肝病毒(HBV)的作用。为临床治疗乙型肝炎探索一条新途径。方法 合成互补于HBVX区(1400-1430)的X片段,互补于HBVP区(2375-2405)的P片段,分别构建表达正、反义X或P的重组逆转录病毒载体质粒PLXSN Xpos/Ppos,PLXSN X,PLXSN P,转染PA317细胞,用假病毒颗粒感染2.2.15细胞后第8天,提取细胞内DNA和RNA,用荧光PCR(FQ-PCR)定量方法检测2.2.15细胞的DNA和RNA。结果 反义RNA对HBVS、C、P三个开放读码区的DNA及RNA抑制作用大。结论 细胞内表达HBV反义RNA。结果 反义RNA对HBVS、C、P三个开放读码区的DNA及RNA抑制作用大。结论 细胞内表达HBV反义RNA是有明显抗乙肝病毒复制和表达的作用。为将来临床应用多基因区抗乙肝病毒治疗及抗变异病治疗打下基础。

关 键 词:乙型肝炎病毒  HBV  反义RNA  基因治疗  病毒复制
文章编号:1002-1949(2001)05-0263-03
修稿时间:2000年12月19

lnhibition of hepatitis B virus by retroviral vectors expressing antisense RNA
WU Chi-hong,ZENG Zheng,WANG Qin-Huan,et al.lnhibition of hepatitis B virus by retroviral vectors expressing antisense RNA[J].Chinese Journal of Critical Care Medicine,2001,21(5):263-265.
Authors:WU Chi-hong  ZENG Zheng  WANG Qin-Huan  
Institution:WU Chi-hong,ZENG Zheng,WANG Qin-Huan,et al Department of Infections Diseases,the First Hospital,PeKing University,Beijing 100034,China [
Abstract:Objective Research on the effects of antisense RNA against HBV infection.Methods Retroviral vector expressing antisense RNA complementary to HBVX(1400-1430),P(2375-2405)was used to transduce 2.2.15 cell.We use FQ-PCR methods to test celluar HBV DNA and HBV RNA.Results The results showed that the celluar DNA and RNA in S、C、P ORFs were greatly inhibited.Conclusions The results demonstrated that retroviral vectors containing shorter antisense fragment can inhibit HBV replication and expression.Therefore the antisense RNA may be potentially useful for anti-HBV gene therapy.
Keywords:Hepatitis B Virus  Antisense RNA  Gene therapy
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