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人MAGE-3基因片段的克隆与测序
引用本文:彭培立,吕颖捷,赵国强,董子明. 人MAGE-3基因片段的克隆与测序[J]. 河南大学学报(医学版), 2005, 24(2): 20-23
作者姓名:彭培立  吕颖捷  赵国强  董子明
作者单位:解放军第155中心医院,放射科,河南,开封,475003;河南省医药学校,基础科,河南,开封,475001;郑州大学基础医学院,微生物学与免疫学教研室,河南,郑州,450052;郑州大学基础医学院,病理生理学教研室,河南,郑州,450052
摘    要:目的克隆表达人MAGE-3基因片段(210~623位碱基),以便研究其对MAGE-3阳性恶性肿瘤的生物学作用。方法为选择靶基因,采用分子生物学软件分析MAGE-3基因抗原表位;并设计MAGE-3靶区域引物。从人肺癌组织标本中提取mRNA,用RT-PCR法从中扩增出MAGE-3片段,对其进行XhoⅠⅡ酶切鉴定;将扩增片段克隆于pGEM-TEasy载体中,转化JM109,进行阳性筛选后,运用pGEM-TEasy质粒的T7/SP6作为引物对重组子鉴定,并进行DNA测序。结果抗原表位分析表明MAGE-3基因片段(210~623位碱基)为抗原决定簇丰富区段。RNA体外扩增得到的片段为414bp,并经XhoⅠⅡ酶切鉴定得到证实;pGEM-TEasy-MAGE-3经筛选鉴定正确,DNA测序结果与Genebank比较完全相同,表明靶基因成功插入pGEM-TEasy。结论该片段可用于真核及原核表达。

关 键 词:肿瘤抗原  基因  MAGE-3  分子克隆  测序
文章编号:1672-7606(2005)02-0020-04
修稿时间:2005-01-25

Cloning and sequencing of the tumor antigen MAGE-3 gene fragment
PENG Pei-li,LV Ying-jie,ZHAO Guo-qiang,DONG Zi-ming. Cloning and sequencing of the tumor antigen MAGE-3 gene fragment[J]. Journal of Henan University, 2005, 24(2): 20-23
Authors:PENG Pei-li  LV Ying-jie  ZHAO Guo-qiang  DONG Zi-ming
Affiliation:PENG Pei-li 1,LV Ying-jie 2,ZHAO Guo-qiang 3,DONG Zi-ming4
Abstract:
Keywords:Tumor antigen  Gene  MAGE-3  Molecular cloning  Sequencing
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