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单细胞悬液制备应注意的问题
作者姓名:张锦宏  罗深秋  柳息洪
作者单位:广州医学院医学遗传学与细胞生物学教研室!广州,510182,第一军医大学医学遗传学与细胞生物学教研室!广州,510515,广州医学院中心实验室!广州,510182
摘    要:流式细胞仪(FlowCytometry,FCM)是目前常用来测量细胞表面荧光免疫标志、DNA含量和钙离子变化的大型精密仪器,但是,利用FCM来做实验分析最常见的问题就是测试时细胞数太少(实验要求为1×106/ml),尤其是用固定剂固定过的细胞。本人发现在离心时如果不采用正确的方法,细胞损失料相当严重。例如,将乙醇固定过的胸腺细胞(1.12×107/ml)在垂直离心机上1000rpm离心10分钟,去固定液,发现细胞只剩下6.4×106/ml;然后用PBS漂洗,离心后去PBS液,细胞剩下3.2×106/nd,经PBS第二次次漂洗,离心后细胞则只有6×105/ml。…

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