小鼠乳鼠心脏成纤维细胞的原代培养及鉴定

目的探索更高效、稳定的小鼠乳鼠心脏成纤维细胞原代培养的方法。方法采用Ⅱ型胶原蛋白酶多次消化法,通过控制乳鼠日龄、胶原蛋白酶含量以及消化时间这三个条件,对小鼠乳鼠心脏成纤维细胞的提取进行优化。使用显微观察心脏成纤维细胞的形态,CCK-8法检测细胞活性,免疫荧光细胞化学染色检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达鉴定细胞纯度。结果 1 d日龄、 1 g/L胶原蛋白酶、每次消化2 min,所得细胞活力最佳,增殖能力最强,且此条件下提取的小鼠乳鼠原代心脏成纤维细胞纯度高于95%。结论建立了高效、稳定的小鼠乳鼠原代心脏成纤维细胞培养方法。